תכונות של יישום ותוצאות העיקריות של התגובה immunofluorescence (שונית, שיטת קון). תגובת immunofluorescence (ישר שונית, ועין rnif) כמו שיטת אבחון אקספרס של מחלות זיהומיות של hemoagglutination או rpga

בשיטה זו, נעשה שימוש בתופעה של הארה.

תמצית תופעת הארה היא שכאשר נספג מינים שונים אנרגיה (אור, חשמל וכו ') מולקולות של כמה חומרים של האטומים שלהם מועברים למדינה הנרגשת, ולאחר מכן לחזור למצב המקורי שלה, מבודד את האנרגיה הקפואה כמו קרינה קלה.

הארה של שונית מתבטאת בצורה של פלואורסצנטי - זוהי זוהר המתרחשת בזמן הקרנה עם האור המרגש ועצר מיד לאחר הסוף.

חומרים רבים ומיקרואורגניזמים חיים יש פלואורסצנטי משלהם (מה שנקרא העיקרי), אבל עוצמתו קטנה מאוד. חומרים עם הקרינה העיקרית אינטנסיבית המשמשים כדי להקנות תכונות פלורסנט עם חומרים נפט, השיג את שם fluorochromas. הקרינה המושרה כזו נקראת משנית.

עבור עירור של הקרינה עם מיקרוסקופית זוהר, אולטרה סגול או כחול סגול של הספקטרום משמש לעתים קרובות ביותר (אורך גל הוא 300-460 NM). למטרות אלה, מעבדות יש מיקרוסקופים זוהרים של מודלים שונים - ML-1-ML-4, Lumam.

בפועל וירולוגי, שתי שיטות בסיסיות של מיקרוסקופית זוהר משמשים: נוגדנים fluorochromic ו פלואורסצנטי (או שונית).

פלואורוכרומציה - זה עיבוד של תרופות עם fluorochromes על מנת להגדיל את הכוח ואת הניגוד של זוהר שלהם. האינטרס הגדול ביותר הוא fluorochrome כתום Acredigne, אשר גורם הקרינה polychromatic של חומצות גרעין. לכן, כאשר עיבוד תרופות עם אלה fluorochromes, חומצה deoxyribonucleic הוא fluorescents בהיר עם ירוק, ואת ribonucleic - רובי אדום.

שיטת השונית היא כי נוגדנים הקשורים fluorochroma לשמור על היכולת להיכנס לאגירה ספציפית עם אנטיגן הומולוגי. צורות של אנטיגן + קומפלקס נוגדנים בשל נוכחות של fluorochrome בו נמצא תחת מיקרוסקופ זוהר על פי הארה אופיינית.

כדי להשיג נוגדנים, השתמשו בסרום Hyperimmune גבוה, שממנו נוגדנים מבודדים והפליאורוכרים שלהם. Fitz Fluorescene Isotocyonda (Great Glow) ו RSX-Rhodamine Sulfochloride (זוהר אדום) משמשים לעתים קרובות ביותר fluorochrome. נוגדנים שכותרתו עם fluorochroma נקראים צמודים.

שיטת ההכנה והציור של תרופות היא כדלקמן:

היכונו על הנושא משקפיים של שבץ, הדפסים מאורגנים או על משקפיים ציפוי - תרבות תאים נגועים; ניתן להשתמש בהיסטופרה;
ההכנות מיובשות באוויר וקבע אצטון מקורר בטמפרטורת החדר או במינוס 15 מעלות צלזיוס (מ -15 דקות עד 4-16 שעות);
צבוע בשיטה ישירה או עקיפה; לווה תחת מיקרוסקופ זוהר על עוצמת הזוהר, מוערך בצלבים.

במקביל, להכין וצבע תרופות מתוך שליטה בריאה.

ישנן שתי שיטות בסיסיות של שימוש נוגדנים פלואורסצנטי: ישר ועקיף.

שיטה ישירה (שלב יחיד). תרופה קבועה מוחלת מצוממת (סרום פלורסנט וירוס לכאורה), לעמוד 30 דקות בטמפרטורה של 37 מעלות צלזיוס בחדר רטוב. ההכנה נשטפת לאחר מכן מתוך צידוג לא מאוחד עם פתרון פיזיולוגי (PH 7.2 - 7.5), מיובש באוויר, הם מוחלים על שמן מבוסס שמן ונבדק תחת המיקרוסקופ.

השיטה הישירה מאפשרת לך לזהות ולזהות את האנטיגן. בשביל זה אתה צריך להיות על כל סרום פלואורסצנטי וירוס.

שיטה עקיפה (דו-שלבית). בסרום לא ידוע המכיל נוגדנים וירוס מיועד מוחל על התרופה הקבועה ב 37 מעלות צלזיוס, נוגדנים בלתי ניתנים לבעלתם. פלורסנט אנטי אהבה סרום מוחל על התרופה, המתאים לסוג של בעל חיים - המפיק של נוגדנים אנטי ויראלי הומולוגיים, נשמר במשך 30 דקות ב 37 ° C. לאחר מכן, התרופה נשטפת נוגדנים שכותרתו שאינם קשורים, מיובשים באוויר, הם מוחלים על שמן הנפט ונבדק תחת מיקרוסקופ זוהר.

סרום אנטי-אהבה מתקבלים על ידי חיסונים גלובוס של בעלי חיים של אותם מינים המשמשים כמו נוגדנים אנטי וירוס המיוצרים. לכן, אם נוגדנים אנטי-ויראליים הושגו על ארנבות, ולאחר מכן השתמשו בסרום פלואורסצנטי.

השיטה העקיפה מאפשרת לא רק לזהות ולזהות את האנטיגן, אלא גם לזהות ולקבוע את טיטר של נוגדנים. בנוסף, שיטה זו יכולה להיות מזוהה על ידי אנטיגן בסרום אחד של וירוסים שונים, כפי שהוא מבוסס על השימוש של אנטי אהבה serums. לעתים קרובות יותר בשימוש אנטי רכיבה, אנטיביזי, סרום antisold ו serums נגד מושלי חזיר גינאה.

פותחו מספר שינויים של השיטה העקיפה. תשומת הלב ביותר היא השיטה באמצעות השלמה. השיטה היא כי סרום ספציפי בלתי פעיל מוחל על תרופה קבועה והשלמה של חזירי גינאה, לעמוד 30 דקות ב 37 מעלות צלזיוס, שטף, וכדי לזהות את אנטיגן + נגד נוגדנים קומפלקס + השלמה, תדירות אנטי פלואורסצנטי סרום מוחל על 30 דקות ב 37 מעלות צלזיוס, שטף, מיובש באוויר וחוקרים תחת מיקרוסקופ זוהר.

יתרונות שונית: ספציפיות גבוהה ורגישות; פשטות של ביצועים; את המספר המינימלי של רכיבים נדרש. זוהי שיטת אבחון אקספרס, שכן בתוך כמה שעות אתה יכול לקבל תשובה. החסרונות כוללים סובייקטיביזם בהערכת עוצמת הזוהר, ולמרבה הצער, לפעמים סרום פלואורסצנטי הם באיכות ירודה. נכון לעכשיו, השונית נמצאת בשימוש נרחב באבחון של מחלות בעלי חיים ויראליות.

אם מצאת טעות, בחר את שבר הטקסט ולחץ על Ctrl + Enter..

שיטת immunofluorescent (שונית, תגובת immunofluorescence, תגובת הקונס) - שיטה של \u200b\u200bגילוי AGs ספציפיים באמצעות מצומדות עם fluorochroma. יש לו רגישות גבוהה וספציפיות.

היא משמשת לאבחון מהיר של מחלות זיהומיות (זיהוי הפתוגן בחומר הנמצא), וכן לקבוע את קולטני פני השטח וסמני לוקוציטים (immunophenyping) ותאים אחרים.

איתור של אנטיגנים חיידקים ויראלי בחומרים זיהומיות, רקמות של בעלי חיים ותרבויות של תאים בעזרת נוגדנים פלואורסצנטי (serums) שנרכשו שימוש נפוץ בפועל אבחון. הכנת סרום פלואורסצנטי מבוססת על היכולת של כמה fluorochromes (לדוגמה, isothiocyanate של fluorescein) להצטרף קשר כימי עם חלבונים בסרום מבלי לפגוע את הספציפיות האימונולוגית שלהם.

ישנם שלושה סוגים של השיטה: ישר, עקיף, עם השלמה. שיטת השונית הישירה מבוססת על העובדה כי אנטיגנים של רקמות או חיידקים שטופלו בסרומי החיסון עם נוגדנים המסומנים עם fluorochromas מסוגלים זוהר קרן UV של מיקרוסקופ פלואורסצנטי. חיידקים במריחה שטופלו בסרום זוהר כזה זוהרים לאורך הפריפריה של התאים בצורה של גבול של ירוק.

שיטת השונית העקיפה היא לזהות את המורכבת באנטיגן - נוגדן באמצעות אנטי-גלובולין (אנטי נוגדנים) עם מי גבינה עם פלואורוצ'רומה. לשם כך, משיכות ההשעיה של חיידקים מטופלים עם נוגדנים סרום אנטימיקרוביאלי. לאחר מכן נוגדנים שאינם מנוגדים לאנטיגנים מיקרוביאליים, והנוגדנים שנותרו על החיידקים חושפים, מטפלים בסרום אנטי-גלובלין (אנטי רכיבה על אופניים) עם פלואורוכרים. כתוצאה מכך, קומפלקס microbe נוצר + נוגדנים ארנב מיקרוביאלית + נוגדנים נגד רכיבה שכותרתו עם fluorochroma. מורכב זה נצפה במיקרוסקופ זוהר, כמו גם עם שיטה ישירה.

מַנגָנוֹן. שבץ מחומר הבדיקה מוכנה בנושא זכוכית, קבוע על הלהבה והוא מטופל עם סרום ארנבון החיסון המכיל נוגדנים נגד אנטיגנים סוחר סיבתי. כדי ליצור קומפלקת אנטיגן - נוגדן, התרופה ממוקמת בחדר רטוב והודעת ב 37 מעלות צלזיוס למשך 15 דקות, ולאחר מכן הוא נשטף ביסודיות עם פתרון איזוטוני של כלוריד נתרן כדי להסיר את הנוגדנים שאינם מחוברים לאנטיגן . לאחר מכן, התרופה מוחלת בסרום אנטי-גלובלין פלורסנט נגד ארנב גלובולינים, שמרו במשך 15 דקות ב 37 מעלות צלזיוס, ולאחר מכן התרופה נשטפת ביסודיות עם פתרון נתרן כלוריד איזוטוני. כתוצאה של כרית פלואורסצנט נגד גלובולין עם אנטיגן קבוע אנטיגן, אנטיגן - נוגדנים, אשר נמצאים מיקרוסקופ פלואורסצנטי נוצרים.

4. באוויר של חדר השינה של הילדים, 75 MT / M3 של Streptococcus, 12 MT / M3 של Staphylococcal ו 1 MT / M3 שחפת חיידקים נמצאו. לתת הערכה סניטרית וחיידיאולוגית של האוויר ולתאר את תוכנית התברואה שלה.

מספר כרטיס הבחינה _54

Retroviruses. זיהום HIV (איידס), ואת הפתוגנים שלה.

וירוס החיסוני האנושי גורם לזיהום HIV על ידי פיתוח הפיתוח של תסמונת הגירעון החיסונית שנרכשו.

הסוכן הסיבתי של זיהום HIV הוא וירוס לימפוטרופי השייך למשפחה retroviridae על ידי הסוג Lentivirus.

תכונות מורפולוגיות: וירוס המכיל RNA. החלקיק הנגיפי של הצורה הכדורית של הקליפה מורכב משכבה כפולה של שומנים חדרו על ידי גליקופרוטאינים. פגז השומנים מגיע ממברנה הפלזמה של התא המארח, שבו הנגיף משוחזר. מולקולת גליקופרוטאין מורכבת מ -2 יחידות משנה הממוקמות על פני השטח של ויריון וחודרת את פגז השומנים שלו.

הליבה של וירוס החרוט, מורכב חלבונים Capsid, מספר חלבונים מטריקס וחלבונים פרוטאז. הגן יוצר שני חוטי RNA, ליישום תהליך של רבייה, HIV יש transcripte הפוך, או הפוך.

הגן הנגיף מורכב מ 3 גנים מבניים עיקריים ו -7 גנים רגולטוריים ופונקציונליים. גנים פונקציונליים לבצע פונקציות רגולטוריות ולהבטיח יישום תהליכי רבייה והשתתפות הנגיף בתהליך הזיהומיות.

הנגיף משפיע בעיקר על T- ו B- לימפוציטים, כמה תאים monocytic (מקרופאגים, leukocytes), תאים תאים עצבים.

תכונות תרבותיות: על תרבות התאים של T-lymphocytes ואת מונוציטים אנושיים (בנוכחות IL-2).

מבנה אנטיגני: 2 סוגים של וירוסים - HIV-1 ו- HIV-2 HIV-1, יש יותר מ -10 גנוטיפים (תת-סוגים): A, B, C, D, E, F ..., שונה בינם לבין עצמם על חומצת האמינו הרכב חלבונים.

HIV-1 מחולק לשלוש קבוצות: M, N, O. רוב הבודדים שייכים לקבוצה מ ', שבו 10 תת-סוגים נבדלים: A, B, C, D, F-F-2, G, N, אני, ק. יציבות: הוא רגיש לגורמים פיזיים וכימיים, מת כאשר מחומם. הנגיף יכול להמשיך להישמר במצב מיובש, בדם מיובש.

גורמי הפתוגניות, הפתוגנזה: הנגיף מחובר ללימפוציטים, חודר לתא ומתכנסות בלימפוציטים. כתוצאה של הרבייה של HIV בלימפוציטים, הם נהרסו או לאבד את המאפיינים הפונקציונליים שלהם. בעקבות הרבייה של הנגיף בתאים שונים, הוא צבר באיברים וברקמות, והוא נמצא בדם, לימפה, רוק, שתן, זיעה, מסתיר ההמונים.

ב זיהום HIV, מספר T-4 לימפוציטים מצטמצם, הפונקציה של B- לימפוציטים מופרעת, הפונקציה של רוצחים טבעיים הוא מדוכא ואת התגובה לאנטיגנים יורד ואת המוצרים של השלמה, לימפה וגורמים אחרים המסדירים את החיסון פונקציות (IL) מופחתות, וכתוצאה מכך את מערכות התפקוד לקוי החיסונית.

מרפאה: מערכת הנשימה מושפעת (דלקת ריאות, ברונכיטיס); CNS (אבצסה, דלקת קרום המוח); GTS (שלשולים), נוירסמים ממאירים מתעוררים (גידולים איברים פנימיים).

זיהום HIV מתרחש במספר שלבים: 1) תקופת הדגירה, שהיא בממוצע של 2-4 שבועות; 2) שלב הביטויים העיקריים, המאופיין בחום חריף בתחילה, שלשולים; השלב של השלב האסימפטומטי והתמדה של הנגיף, שיקום רווחה, נקבע, אך נוגדנים של HIV, 3) נקבעים בדם, בשלב של מחלות משניות המתבטאות על ידי הנשימה, העצבנות מערכת. זיהום HIV הוא גרוע יותר, שלב ה -4 מסוף של איידס.

אבחון מיקרוביולוגי.

וירולוגיה I. לימודים סרולוגיים כלול שיטות לקביעת נוגדן אנטיגנים ו- HIV. לשימוש זה ELISA, IB ו- PCR. בסרום של HIV-1 חולים ו- HIV-2 מכילים נוגדנים לכל חלבונים וירוסים. עם זאת, נוגדנים לחלבונים GP41, GPL20, GPL60, P24 ב HIV-1 ו נוגדנים נקבעים לאשר את האבחון, GP36, GPL05, GPL40 ב HIV-2 חלבונים. נוגדנים HIV מופיעים ב 2-4 שבועות לאחר ההדבקה ונקבעים בכל שלבי HIV.

שיטת זיהוי הנגיף בדם, לימפוציטים. עם זאת, עם כל מדגם חיובי, התגובה IB מוגדר כדי לאשר את התוצאות. PCR משמש גם מסוגל לזהות זיהום HIV בדגירה תקופה קלינית מוקדמת, אבל הרגישות שלה נמוכה במקצת מאשר אליסה.

אבחונים קליניים וסרולוגיים מאושרים מחקר אימונולוגיאם הם מצביעים על נוכחותם של חסינות בחולה הנבדק.

מערכת הבדיקה של immunoferment האבחון לקביעת הנוגדנים ל- HIV כוללת אגא ויראלי, adsorbed על מוביל, ATI נגד IG. המשמש לסידורי סירות.

טיפול: שימוש במעכבי טרנספורמטיביים הפוך בתאים מופעלים. ההכנות הן נגזרות רודדות - אזידותיידין ופיקפוחייד.

מְנִיעָה. ספציפי - לא.

השפעתם של גורמים פיזיים וכימיים על החיידקים. מוטציה וערכו לרפואה מעשית. דוגמאות. ערך אקולוגיה.

את ההשפעה של גורמים כימיים וביולוגיים.

פעולה של כימיקלים

כימיקלים יכולים להאט או לדכא לחלוטין את הצמיחה של מיקרואורגניזמים. אם החומר הכימי מדכא את הצמיחה של חיידקים, אבל לאחר ההסרה, הצמיחה שלהם מתחדשת שוב.

חומרים מיקרוביאליים, בהתחשב בחשבון את המבנה הכימי ואת מנגנון הפעולה החיידקית שלהם על חיידקים, ניתן לחלק לקבוצות הבאות: חמצון סוכנים, הלוגנים, תרכובות של מתכות, חומצות alkali, פעילי שטח חומרים פעילים, אלכוהול, צבעים, נגזרות פנול פורמלדהיד.

חמצון. קבוצה זו כוללת מי חמצן אשלגן permanganate.

הלוגנים. כלור, יוד וסמים שלהם: כלור סיד, כלור ב, רקמנטידה, פתרון אלכוהול יוד 5%, Iodinol, Iodoform.

תרכובות של מתכות כבדות (מלח עופרת, נחושת, אבץ, כסף, כספית, חיבורי מתכת כסף: potargol, collargol). תרכובות אלה מסוגלים לספק הן פעולה מקומית מיקרוביאלית ומלוכלכת על בד מאקרו-אורגניזם.

חומצות ואלקליס. הפעולה החיידקית של חומצות ואלקליס הן התייבשות של מיקרואורגניזמים, שינוי PH של המדיום התזונתי, הידרוליזה של מערכות קולואידיות והיווצרות של אלבורים חומציים או אלקליין.

צבעים יש נכסים לעכב את הצמיחה של חיידקים. הם פועלים לאט, אבל באופן סלקטיבי יותר.

פורמלדהיד - גז חסר צבע. בפועל, פתרון מימית של 40% של פורמלדהיד (פורמלין) משמש. גזים ומתמוסקים במים פורמלדהיד הרסני משפיע על צורות הצומח והמחלוקת של חיידקים.

השפעת הגורמים הביולוגיים

השפעת הגורמים הביולוגיים היא בעיקר באנטגוניזם של חיידקים, כאשר המוצרים של הפעילות החיונית של כמה חיידקים קובעים את מותם של אחרים.

אנטיביוטיקה (מיוונית, אנטי-אנטי-ביולוגי - חיים) - חומרים פעילים ביולוגיים שנוצרו במהלך חייו של פטריות, חיידקים, בעלי חיים, צמחים ויצרו על ידי סינתטי, מסוגל לדכא באופן סלקטיבי ולהרוג מיקרואורגניזמים, פטריות, ריקטסיה, וירוסים גדולים, הפשוטה ביותר ו helminths נפרדים.

3. התגובה של הפעילות הביולוגית של אנזימים חיידקיים במהלך שיגרון, חשיבות אבחון ומעשית, תפקיד המגן של נוגדנים נגד אנזימים באקסימטים שנרכשו (הגדרה של antihialuromanonidase ואנטי steptolisin).

שיגרון הוא המחלה הכוללת של אופי מדבקת-אלרגי, שבו הרקמה החיבור מושפעת, בעיקר את מערכת הלב וכלי הדם, כמו גם מפרקים, איברים פנימיים, מערכת העצבים המרכזית. הוא האמין כי הגורם להתפתחות של שיגרון הוא הפעלת מיקרואורגניזמים פתוגניים, בעיקר קבוצת בטא-המוליטית סטרפטוקוקוס א 'זה התפקיד העיקרי שלו באטיולוגיה ופתוגנזה של מחלה ראומטית. ראשית, המחלה מתפתחת על הרקע זיהום סטרפטוקוקלי. שנית, בדם של חולים יש מספר גדול של נוגדנים למיקרואורגניזמים של קבוצה זו. שלישית, מניעת המחלה מתבצעת בהצלחה על ידי תרופות אנטיבקטריאליות.

עם דלקת מפרקים שגרונית, ממברנות סינוביאליות, על ידי סיבות לא ברורות, להפריש כמות גדולה של אנזים גלוקוז-6-פוספט dehydrogenase אשר גם הורס איגרות החוב של תאמום התא. במקרה זה, יש "דליפה" של אנזימים proteolytic מ lysosomes התא, אשר לגרום נזק עצמות בקרבת מקום סחוס. הגוף מגיב לכך על ידי ייצור ציטוקינים, שביניהם יש גם גורם נמק גידול α tnf-α. מפלגות של תגובות בתאים שהושקו על ידי ציטוקינים, עוד להחמיר את הסימפטומים של המחלה. דלקת שגרונית כרונית הקשורה ל- TNF-α, לעתים קרובות גורם נזק לסחוס והמפרקים המובילים לנכות פיזית.

נפתח בשנת 1942 על ידי קון, התגובה immunofluorescence היא לא שיטת מחקר חדש. עם זאת, הופעתה של טכנולוגיות היברידומיות שאפשרות להשיג נוגדנים חד-לאומיים, נתנו "החיים השני" של תגובה זו, שכן השימוש שלהם מותר מספר פעמים להגדיל את הרגישות של תגובה זו ואת הספציפויות שלה.

והיום אנחנו אגיד לך בפירוט על התגובה של immunofluorescence ישירה ועקיפה (שונית) כשיטה לאבחון קונים למבוגרים גברים ונשים במהלך ההריון.

מהי התגובה immunofluorescence

המייצג הזדמנות מצוינת להגיע במהירות אבחון מדויקהתגובה immunofluorescence מאפשרת לקבוע את נוכחותו של הסוכן הסיבתי של המחלה בחומר הפתולוגי. לשם כך משמש שבץ של חומר, אשר מעובד במיוחד באמצעות שכותרתו (fluorescene isothiocyanate), והוא למד ניתוח הטרוגני.

כדי להשיג את התוצאה, מיקרוסקופ זוהר משמש, במערכת האופטית שלה יש קבוצה של מסננים אור כדי לספק הכנה עם אור כחול או סגול אולטרה סגול בעל אורך גל מראש. מצב זה מאפשר את fluorochrum להיות מוסר בטווח נתון. החוקר נאמד על ידי המאפיינים של הזוהר, אופייה, גודלו של אובייקטים ופרשנותם.

למי הוא prescribed

התגובה immunofluorescence ניתן להקצות באבחון של מערכת של מחלות ויראליות. בפרט, הוא מונה עם בדיקה מקיפה לזיהוי הגורמים הבאים:

נוכחות בגוף הנגיף;
זיהום סלמונלה;
קיום בגוף של אנטיגנים מסוימים;
ההסתברות של זיהום עם Chlamydia, Mycoplasmas ומיקרואורגניזמים אחרים שיש להם את היכולת ליזום מחלות וירוס אנושיות מזוהים;
אבחון של מחלות ויראליות בבעלי חיים.

אינדיקציות אלה מאפשרות להשתמש בתגובת החיסונים בעת זיהוי מחלות ויראליות באורגניזם אנושי ובעלי חיים.

מטרות

מאז שיטת אבחון זו יש יתרונות רבים אשר הביצועים הגבוהים שלה, מהירות וקבלת התוצאה, כמו גם היעדרות מספר גדול התוויות נגד, הוא נקבע על ידי העובדה כי זיהום ויראלי. לכן, ניתן להקצות לניתוח זה הן עבור הניסוח והן להבהיר את האבחון, על בסיס מתן הטיפול.

ההליך אינו גורם לתחושות לא נעימות, יש צורך להשיג חומר לניתוח, אשר נלקח מכל נוזל גוף: רוק, כיח, שריטות מפני השטח של הממברנות הריריות. גם אולי יש דם לניתוח. תדר התגובה immunofluorus מקצה רופא אשר צריך לקבל נתונים על הדינמיקה של תהליכים המתרחשים בגוף.

מאז הפגיעה הן בגוף והן עבור רווחה כללית של אדם אינה נושאת ניתוח זה, ניתן למנות אותו לפי הצורך.

סוגי הליך כזה

כיום, מספר זנים של ניתוח זה משמשים, שכל אחד מהם יש מספר תכונות ספציפיות ומאפשר לך לקבל את התמונה הפרית ביותר של התהליכים המתרחשים בגוף.

הזנים של תגובת immunofluorescence כוללים:

- אחד הסוגים המתפתחים ביותר של אבחון, ניתוח זה מאפשר להשיג נתונים כמותיים ללא שימוש בדילולים סדרתי. בשל שימוש במדידות שהושגו של הצפיפות האופטית של הנוזל, מתברר בקביעו במדויק את רמת הריכוז של הרכיב הרצוי. האפשרויות הרחבות של סוג זה של ניתוח משמשות כאשר נעשה שימוש ביישום נוגדנים מונוקלונליים, המאפשרים לקבוע את השלב של התהליך המדבק, החדות שלה;
דנ"א אבחון - שיטה זו מבוססת על מחייב משלים של נוקליאוטידים, אשר נוזלים כאלה ניתן להשתמש, הן רוק, דם, משקה, השקיה, קול, bioptats, דם. שיטה זו ביעילות ביותר מאפשרת לך לזהות את נוכחות של וירוסים papilloma בגוף, אבל רבים מערכות בדיקה מודרנית עשויים לפעמים לתת תוצאות שליליות חיוביות ושקריות. הסיבה להם יכול להיות דוגמאות נוזל מזוהמים לניתוח DNA ספציפי, אשר נוכחות אשר יכול להיות הקן או הטבע הכולל;
immunochromotography - הספציפיות של שיטה זו של קביעת נוכחות בגוף של הסביבה הפתולוגית והווירוסים היא לשמש במהלך התגובה של נוגדנים שכותרתו. שיטה זו של אבחון משמשת לזיהוי ותרגול הפעילות של תהליך ההדבקה עם קבוצות Streptococci א ', כמו גם Chlamydia של הסוגים הבאים: Clamikit R Innotech הבינלאומי, Clearview TM Chlamydia oxoid. בעל הרגישות הגבוהה ביותר האפשרית, מערכות בדיקה המבוססות על מתודולוגיית מחקר זו. בדרך כלל מוחל כבדיקה אינדיקציה.

לזנים המפורטים יש תכונות ומאפיינים ספציפיים של התוצאות, אך כולם נועדו להשיג נתונים בנוכחות מיקרואורגניזמים ווירורגני פתולוגיים בגוף, כמו גם את מידת הרבייה והפעילות שלהם.

אינדיקציות לחזקות

התגובה immunofluorescence ניתן להקצות לזהות בגוף של כל סוג של סביבה פתולוגית.

Chlamydia, Trichomonas, Gonokokki, כמו גם giardia מכל הסוגים נקבעים במהלך סוג זה של אבחון. ו, ומחלות אחרות גם דורשים שונית. מינויו של רופא ליישומו נחוץ.

התוויות נגד החזקות

מאז אין סוג של נוזל הגוף כחומר למד לבצע את החומר תחת המחקר, זה בדרך כלל לא קשה לקחת קשיים התוויות נגד ליישם את התגובה immunofluorescence. עם זאת, במהלך ההריון והילדים מתחת ל -6 חודשים, המתבצעת החומר למחקר עם אמצעי זהירות מקסימליים.

היעדר התוויות נגד מאפשר לך לבצע את סוג זה של אבחנה כאשר מינוי רופא לכל החולים. בטיחותה מובטחת באמצעות כלי לחטא ומזרקים חד פעמיים.

הכנה לנוהל

אין תכונות לקחת חומר לניתוח זה. הדם בשבילו נלקח על בטן ריקה, כך שאין בתוכן גבוה של חומרים, אשר יכולים לשנות את העדות האמיתית ולתת תמונה שקרית.

איך מבחני

מכיוון שאין צורך בהכנה מיוחדת לניתוח, רק הארוחה אינה נכללת 12 שעות לפניו וחוסר היישום תכשירים רפואייםנטילת חומר הבדיקה כתהליך הרגיל של לקיחת נוזל הגוף על הניתוח מתבצעת.

תחושות סובייקטיביות במהלך ההליך עשויות להשתנות בהתאם לרגישות.

פענוח תוצאות

השימוש במערכות בדיקה מודרנית מאפשר לך לקבל את תוצאות הניתוח המדויק ביותר. הנתונים הבאים חלים על פענוח התוצאה:

מידת העוצמה של הקרינה;
צל של פלואורסצנטי;
האופי הפריפריאלי של מושא האובייקט של האובייקט;
המאפיינים של מורפולוגיה, מיקומו של הסוכן הסיבתי במרץ של החומר הנמצא וממדיו.

במהלך לימוד אובייקטים עם גדלים גדולים (למשל, Gorderell, Trichomonas, תאים כי הם כבר נדהם על ידי וירוסים) המפורטים מעל הקריטריונים מאפשרים להשיג את התוצאות הכי אמין. עם זאת, הגופים היסודיים של mycoplasma ו chlamydia יש מימדים שוכבים בגבול של החלטה של \u200b\u200bמיקרוסקופ זוהר, אשר

קבלת תוצאה מדויקת, שכן זוהר הפריפריאלי מאבד חלק מעוצמתו. הקריטריונים הנותרים אינם מספיקים כדי לזהות במדויק את המיקרואורגניזמים הנדונים. מסיבה זו, דרישות מיוחדות מוטלות על מומחים המבצעים סוג זה של מחקר: רמת ההסמכה שלהם צריכה להיות מספקת לנתונים תפעוליים.

מסיבה זו, רק רופא עם רמת ההסמכה המתאימה ניתן לטפל פענוח הניתוח. קרא את המחיר עבור שיטת השונית להלן.

מחיר ממוצע

מחיר התגובה של אימונופלורסנס תלוי במקום אחזקותיה ורמת המוסד הרפואי, וכן את הכישורים של ניתוח המנהל של מומחה. כיום, עלות טווחים 1280 ל 2,160 רובל.

לקבלת מידע נוסף על תגובות אימונולוגיות, הווידאו יוביל את הווידאו להלן:

בעגביס הראשוני, הוא נחקר על שנקרה מוצקה חיוורת מופרדת או מידה של צמתים לימפיכיים. עם עגבת משנית, החומר נלקח מפני השטח של papules משודר על העור, ממברנות ריריות, עם סדקים, וכו 'לפני לקיחת החומר לטהר ממהמים שונים, את פני המוקדים (שחיקה, כיבים, סדקים) חייב להיות מנגן היטב עם טמפון טנק סטרילי, אשר הוא הרטוב על ידי פתרון איזוטוני נתרן כלורי או להקצות bummer עם אותו פתרון. משטח מטוהרים מיובש עם טמפון יבש ופלטינום לולאה או מרית, חלקים היקפיים הם מעט מגורה, בעת ובעונה אחת לסחוט את הבסיס של האלמנט עד נוזל הרקמה (ההגשה) מופיע כי התרופה מוכנה למחקר. הכנת נוזל הרקמה חשוב לאבחון של עגבת, שכן טרפונים חיוורים נמצאים בלומנים של נימי הלימפה, בקרמים רקמות סביב כלי הלימפה והדם.

לנקב של בלוטות לימפה אזורית

העור מעל צמתים לימפה מטופל עם אלכוהול 96% ו 3-5% אלכוהול יוד. ואז 1 ו -2 אצבעות של מברשת שמאל לתקן את הצומת הלימפה. יד ימין הם לוקחים מזרק סטרילי עם כמה טיפות של פתרון כלוריד איסוטוני נתרן, אשר רותח במקביל לציר האורך של הצומת הלימפה. המחט דוחפת בכיוונים שונים לקיר הנגדי של קפסולת הצומת ואת התוכן של המזרק נכנס לאט. אצבעות של מברשת שמאל הלימפה צומת מעט עיסה. עם חילוץ לאט את המחט בו זמנית לדחוף את הבוכנה של המזרק, שואף את התוכן של הצומת הלימפה. החומר מוחל על השקופית (עם כמות קטנה של חומר, טיפה של פתרון נתרן איזוטוני כלוריד הוא הוסיף, מכוסה זכוכית ציפוי. המחקר של ההכנה יליד מתבצע בתחום כהה של נוף באמצעות מיקרוסקופ אופטי-אור עם ציר כהה קונדנסר (עדשה 40, 7x, 10x או 15x). ניתן גם להתגלות טרפונמים חיוורים בהכנות מצוירות. כאשר ציור על רומנובסקי-גונזמה, טרפונים חיוורים צבועים בצבע ורוד, על המזרקה והכפור בחום (שחור), על פי שיטת בורורי, טרפונות לא צבועות מזוהים על רקע כהה.

אבחון סריק

חשיבות חשובה באבחון עגבת, הערכת האפקטיביות של הטיפול, הקמת קריטריון קריטריון, גילוי צורות מוסתרות, עמידות לתגובות סטנדרטיות (קלאסיות) וספציפיות. לתגובות סרולוגיות סטנדרטיות או קלאסיות (DSR) כוללות:

תגובת וושמן (RV),
תגובות משקעים של Cana ו Zaksa Vitebsky (ציטוכולה),
תגובה לזכוכית (שיטה אקספרס),

כדי ספציפי:

את התגובה של immobilization של treponia חיוור (ribt),
תגובת immunofluorescence (שונית).

תגובת וושמן (RV)

- שפותחה על ידי א 'וסרמן (א.אולרמן) יחד עם A.NESTER (A.Neisser) ו- C.Bruck (C.Bruck) בשנת 1906. התגובות של Vasserman מבוססת על תופעה מחייב משלימה (תגובת Bordeland) ומאפשרת לך לקבוע נוגדנים אנטי אניה (מגיבים). על פי רעיונות מודרניים, נוגדנים ליאתות של מקרורניות נקבעים בתגובתו של וושמן, ולא סנפיר חיוור והתגובה מזהות תהליך אוטואימוני, הנגרמת על ידי danaturing על ידי סנפירים חיוורים של רקמות מקרורגני כדי ליצור מורכב ליפופרוטאין (מצומד ), שבו ליפידים (הגידונים) הם דטרמיננטיים.

בדרך כלל ה- RV מורם עם שניים או שלושה אנטיגנים. לרוב, רגישות גבוהה של אנטיגן קרדיוליפין (תמצית של שור, מועשר עם כולסטרול ולציטין) ואנטיגן תרופה (מטופלים באולטרסאונד, השעיית תרבות אנטוגנית חיוורת טרפונאם) מוחלים לרוב. יחד עם המגיבים של המטופל בסרום הדם, אנטיגנים אלה יוצרים מורכבים החיסונית המסוגלת לאסורבינג ולשותף השלמה. עבור ההגדרה החזותית של המתחם המוצב (להגיב + אנטיגן + השלמה), מערכת hemolytic משמש אינדיקטור (תערובת של RAM erythrocytes עם סרום hemolytic). אם השלמה מחוברת בשלב אחד של התגובה (להגיב + אנטיגן + השלמה), המוליזה לא תתרחש - תאי דם אדומים נופלים לתוך משקעים בולט בקלות (PB חיובי). אם בשלב אחד, השלמה אינה קשורה בשל היעדר מגיב בסרום הבדיקה, היא תשמש את המערכת המוליטית והמוליזה תתרחש (RV שלילי). מידת חומרת המוליזה תחת ניסוח ה- RV מוערכת על ידי המקצוענים: היעדר מוחלט של המוליזה +++ או 4+ (פליז RV); בקושי התחיל hemolyyysy + + או 3 + (RV חיובי); המוליזה משמעותית + + או 2 + (RV חלש); תבנית לא מובנת של המוליזה ± (RV מפוקפקת); המוליזה מלאה - (תגובת וושמן היא שלילית).

בנוסף להערכה איכותית של RV, יש הצהרה כמותית עם רביית סרום שונים (1:10, 1:20, 1:80, 1: 160, 1: 320). Titer של הכורים נקבע על ידי הדילול המרבי, אשר עדיין נותן תוצאה חיובית (4 +) חדה. RV כמותי ניסוח חשוב באבחון של כמה צורות קליניות זיהום עגבת, כמו גם בעת מעקב אחר האפקטיביות של הטיפול. נכון לעכשיו, תגובתו של Vasserman ממוקם עם שני אנטיגנים (קרדיוליפין ו tronewhen השמיע זן של reiter). ככלל, RV הופך חיובי במשך 5-6 שבועות לאחר הזיהום ב 25-60% מהחולים, ב -7-8 שבועות - 75-96%, ב -9-19 שבועות - 100%, אם כי בשנים האחרונות לפעמים זה לפעמים או מאוחר יותר. במקביל, הגידול של הכורים גדל בהדרגה ומגיע לערך המקסימלי (1: 160-1: 320 ומעלה) במקרה של פריחות כלליות (עגבת טריות משנית). עם חיוביות של RV, האבחנה של עגבת סוסופוסיטיבית ראשונית נעשית.
עם משני טרי וכן עוף משני חוזר RV חיובי ב -100% מהחולים, אך תוצאה שלילית עשויה להיות נצפתה בחולים מותשים עם חסינות מוחלשת. לאחר מכן, Titer של הכורים בהדרגה פוחתת ועם עגבת חוזרת משנית בדרך כלל לא עולה על 1: 80-1: 120.
עם עגבת שלישוני RV הוא חיובי ב 65-70% מהחולים והוא בדרך כלל יש כור נמוך Titer (1: 20-1: 40). עם צורות מאוחר של עגבת (עגבת של איברים פנימיים, מערכת העצבים), RV חיובי הוא ציין 50-80% מהמקרים. Titer של Reacts נע בין 1: 5 ל 1: 320.
עם עגלים מוסתרים RV חיובי נצפה ב -100% מהחולים. כורים titer מ 1:80 ל 1: 640, ועם חטיפה מוסתר מאוחר מ 1:10 ל 1:20. ירידה מהירה ב titer של reacts (עד להשלים שלילי) במהלך הטיפול מציין את האפקטיביות של הטיפול.

חסרונות של התגובה של וושמן - רגישות לא מספקת (ב שלב ראשוני סאביס ראשוני שלילי). זה גם שלילי ב 1/3 של חולים, אם הם טופלו באנטיביוטיקה בעבר, בחולים עם עגבת פעילה שלישוני עם נגעים של העור ואת הריריות, מנגנון נושא עצם, איברים פנימיים, מערכת העצבים המרכזית, עם מאוחר עגבת מולד.
ספציפיות לא מספקת - התגובה של Wasserman יכול להיות חיובי אצל אנשים שלא פגעו בעבר ולא לפגוע בעגבת. בפרט, ללא דופן (nonspecific) תוצאות RV נצפים בחולים הסובלים זאבת אדומה מערכתית, צרעת, מלריה, neoplasms ממאיר, נגעים בכבד, אוטם שריר הלב והמערכות אחרות, ולפעמים אנשים בריאים לחלוטין.
תגובה קצרה של Wasserman לטווח קצר מזוהה אצל כמה נשים לפני הלידה או אחריהם, באנשים התעללות בסמים, לאחר הרדמה, צריכת אלכוהול. ככלל, RV חיובי שווא הוא בא לידי ביטוי בצורה גרועה, לעתים קרובות יותר עם טיטר נמוך של כורים (1: 5-1: 20), חיובי (3 +) או חיובי חלש (2 +). עם סקרים סרולוגיים המוניים, התדירות של תוצאות חיוביות שווא היא 0.1-0.15%. כדי להתגבר על רגישות לא מספיק, אנו משתמשים בניסוח של הקור (התגובה של הצווארון) ובאותו זמן הוא גדל עם תגובות סרולוגיות אחרות.

תגובות משקעים של Cana ו Zaks-Vitebsk

התגובה של וסרמן משמשת במתחם עם שניים תגובות משקעיות (כנא ו zaksa vitebsk), בעת הפקת אנטיגנים מרוכזים יותר מתכוננים. שיטה אקספרס (microronastract על זכוכית) - מתייחס לתגובות שומנות והוא מבוסס על התגובה של משקעים. הוא ממוקם עם אנטיגן ספציפי Cardiolipin, 1 טיפה של אשר מעורבב עם 2-3 טיפות של סרום הבדיקה בבארות של צלחת זכוכית מיוחדת.
יתרון - מהירות הקבלה (לאחר 30-40 דקות). התוצאות מוערכות על ידי כמות המשקע ופתיתים. חטיבות מוגדרת KSR - 4+, 3 +, 2 + ושלילי. יש לציין כי תוצאות חיוביות שווא נצפים לעתים קרובות יותר מאשר עם RV. ככלל, שיטת אקספרס משמשת לסקרי מסה עבור עגבת, במהלך הבדיקה במעבדות קליניות ואבחון, מחלקות וסומטיות ובתי חולים. בהתבסס על תוצאות השיטה אקספרס, האבחנה של עגבת אסורה, השימוש שלה אינו נכלל בנשים בהריון, תורמים, כמו גם לשליטה לאחר הטיפול.

תגובה של immobilization של treponam חיוור (ribt)

תגובה של immobilization של treponam חיוור (ribt)- מוצע בשנת 1949 על ידי R.Nelson (R.W.Nelson) ומי מאייר (M.Mayer). זהו מבחן האבחון הספציפי ביותר על עגבת. עם זאת, המורכבות ואת העלות הגבוהה של ההגדרה מגבילה את בקשתו. בסרום של חולים, נוגדנים ספציפיים וידאו (immobilizins) נקבעים, אשר מובילים לתנועות של treponia חיוור בנוכחות השלמה. האנטיגן הוא חי חיוור פתוגני, שהוקצו מארנבים נגועים בעגבת. בעזרת מיקרוסקופ, יש לאבד ניידות (משותקת) טרופוניה חיוורת ותוצאות של RIFT מוערכים: immobilization של treponia חיוור מ 51 עד 100% הוא חיובי; מ 31 ל 50% - חיובי חלשה; מ 21 עד 30% - מפוקפק; 0 עד 20% - שלילי.
Ribt ענייני עם אבחון דיפרנציאלי להפרדת תגובות סרולוגיות חיוביות מזויפות מהתגובות שנגרמו על ידי עגבת. מאוחר הופך חיובי מאשר RV, שונית ולכן כדי לאבחן צורות מדבקות של עגבת, הוא אינו מיישם אותואמנם בתקופה המשנית של עגבת, זה חיובי ב 85-100% מהחולים.
בתקופת השלישוני של עגבת עם הנזק לאיברים הפנימיים, מערכת השרירים, מערכת העצבים של Ribt חיובית ב 98-100% מהמקרים ( RV הוא לעתים קרובות שלילי).
יש לזכור כי Ribt עשוי להיות חיובי כוזב במקרה של נוכחות בסרום הבדיקה של ההכנות trepneemocide (פניצילין, tetracycline, macrolite, וכו '), אשר לגרום immobilization לא ספציפי של treponia חיוור. לשם כך, הדם לריבט נחקר לא מוקדם מ -2 שבועות לאחר תום קבלת הקבלה של אנטיביוטיקה ותרופות אחרות.
Ribt, כמו גם שונית בתהליך הטיפול הוא לאט negativated, ולכן הוא אינו חל כבקרה בתהליך הטיפול.

תגובת immunofluorescence (שונית)

תגובת immunofluorescence (שונית) - תוכנן בשנת 1954, אקוונים פותחה בפעם הראשונה לאבחן deaccon, falcone, האריס syphilitic זיהום בשנת 1957. שונית מבוססת על שיטה עקיפה לקביעת נוגדנים ניאון. אנטיגן לייצור הוא trepnemes חיוור פתוגני, אשר מוחלים על ידי סרום הבדיקה. אם יש נוגדנים מחייבים הקשורים IGM ו- IGG בסרום הבדיקה, הם קשורים היטב עם אנטיגן - Treponam, אשר זוהה במיקרוסקופ זוהר בעזרת אנטי אהבה ("אנטיקפרס") פלורסנט סרום.
תוצאות RIF. הם נלקחים בחשבון על ידי עוצמת הארה של טרפונאם חיוור בתרופה (זוהר ירוק צהוב). בהיעדר נוגדנים בסרום אנטי-רפלקטיביים, לא מוגדרים טרפונים חיוורים. בנוכחות נוגדנים, זוהר של Treponia חיוור מזוהה, את מידת אשר באה לידי ביטוי בתוספות: 0 ו 1 + - תגובה שלילית; מ 2 + ל 4 + - חיובי.
השונית מתייחסת לתגובות קבוצתיות של TroneWn ועלה בגידול של סרום מבחן 10 ו 200 פעמים (RIF-10 ו- RIF-200). RIF-10 נחשב רגיש יותר, אבל לא ספציפי תוצאות חיוביות לעתים קרובות נופלים מאשר כאשר RIF-200 מוגדר (יש ספציפיות גבוהה יותר). בְּדֶרֶך כְּלַל, שונית הופכת חיובית מוקדם יותר מאשר RV - חיובי בסבוליס סדרה ראשוני ב -80% מהחולים, ב -100% בתקופה המשנית של עגבת, תמיד חיובי עם עגבת מוסתרים וב -95-100% מהמקרים בצורות מאוחרות ובכיסות מולד.
שונית ספציפיות גדל לאחר העיבוד הראשוני של סרום הבדיקה עם אנטיגן Treponem אולטרה אולטרה, אשר נקשר נוגדנים קבוצתיים (שונית ABS).
אינדיקציות לריב ושונית - אבחון של עגבת מוסתרים כדי לאשר את הספציפיות של קומפלקס של תגובות שומנות במקרה של ההנחה של זיהום עגבת על בסיס RV חיובי. Ribt חיובי ושונית הם הוכחה של עגבת סמויה. עם RV חיובי כוזב עם מחלות שונות (זאבת אדומה מערכתית, neoplasms ממאיר, וכו ') ואם התוצאות החוזרות של Ribt ושונית שליליות, זה מצביע על אופי לא ספציפי של RV. חשד של נזק חבליטי מאוחר לאיברים הפנימיים, מערכת השרירים והשלד, מערכת העצבים בנוכחות החולים עם RV שלילי. חשד של עגבת סרונה ראשונית, כאשר חולים עם מחקרים מרובים מופרדים מפני השטח של שחיקה (כיבים), עם טריפון חיוור לא זוהה מתוך בלוטות הלימפה הגדולה, לא זוהה - במקרה זה רק שונית הוא 10.
בעת בחינת אנשים עם RV שלילילמי יש מין לטווח ארוך ומגעים מקומיים עם חולי סייפיליס, בהתחשב באפשרות לטפל בהם בעבר האחרון של תרופות אנטי חומציות שגרמו ל- RV השלילי. ניתוח Envunimenal (Elisa, Elisa - Enzymeleinked Immunosorbent Assay) - השיטה מתוכננת על ידי e.engvall et al, s.avrames (1971). המהות מורכבת בשילוב של אנטיגן עגבת, שופע על פני השטח של המוביל של השלב מוצק עם הנוגדן של סרום הבדיקה ואת גילוי של המתחם הספציפי של נוגדן אנטיגן בעזרת סרום חיסון נגד אהבה על ידי האנזים . זה מאפשר לך להעריך את התוצאות של אליסה ויזואלית למידת השינוי בצבע המצע תחת הפעולה של האנזים הכלול מצומד. תוצאות IFA לא חוקיים עשויות להתעורר כתוצאה של גידול לא מספיק של Ingradients, הפרעות של טמפרטורה ומצבים זמניים, אי התאמה של pH של פתרונות, זיהום של מנות מעבדה, טכניקה שטיפה לא נכונה.

תגובת hemagglutination פסיבית (RPGA)

הוא מוצע כמבחן אבחון בעגבת T.Rathlev (1965,1967), T.Tomizawa (1966). Macromodification של התגובה נקרא TRP, Microdification - MNA-TP, גרסה אוטומטית - Amna-tr, תגובה עם multipochapsums מן polyurea במקום erythrocytes - MSA-TR. הרגישות והספציפיות של RPGs דומים לריב, שונית, אבל RPGA יש פחות רגישות בצורות המוקדמות של עגבת לעומת שונית ABS ויותר במועד מאוחר יותר, עם עגבת מולדת. RPGA ממוקם באיכות גבוהה ואופציות כמותיות.

דם לוקח טכניקה לתגובות סרולוגיות

עבור מחקר על RV, שונית, Ribt דם לוקח מן המרפק על בטן ריקה או לא מוקדם יותר מ 4 שעות לאחר הארוחות עם מזרק סטרילי או מחט אחת (Samoter). במקום העור, העור מטופל מראש עם אלכוהול 70%. המזרק ואת המחט יש לשטוף עם פתרון נתרן כלוריד איזוטוני. 5-7 מ"ל של הדם תחת המחקר הוא שפכו לתוך צינור נקי קר יבש. נייר נקי עם שם המשפחה, ראשי התיבות של המטופל, היסטוריית המחלה או כרטיס החוץ, מספר ההמראה של הדם מודבק לצינור הבדיקה. לאחר נטילת הדם, צינור הבדיקה ממוקם במקרר עם משטר טמפרטורה + 4 ° + 8 ° C למחרת. למחרת, סרום מיזוג למחקר. במקרה של אי-שימוש בדם למחרת, יש להתמזג את הסרום עם שעון ולאחסן לא יותר משבוע במקרר. עבור מחקר על צליל, צינור הבדיקה חייב להיות מוכן במיוחד סטרילי. במקרה של הפרה של חוקי צריכת הדם למחקר, הכישלון עומד בתנאים עשוי להיות מעוות על ידי התוצאות.
לא מומלץ לעשות דם למחקר לאחר הארוחות, אלכוהול, אמנים שונים מכורים לסמיםלאחר כניסתה של חיסונים שונים במהלך מחזור חודשי בקרב נשים.
עבור מחקר על שיטה אקספרס, הדם נתפס מתוך קצה האצבע, כפי שנעשה כאשר לוקחים אותו על סויה, אבל לקחת דם על 1 נימי יותר. שיטה אקספרס ניתן גם להיות ממוקם עם סרום שהושג באמצעות enopunction. אם יש צורך במחקר בדם במעבדות מרוחקות, במקום דם ניתן לשלוח סרום יבש (שיטת ירידה יבשה). עבור זה, למחרת לאחר נטילת דם, סרום מופרד מן קריש וסוג ב מזרק סטרילי בסכום של 1 מ"ל. בסרום הוא שפך אז בצורה של 2 מעגלים נפרדים על רצועת נייר צפוף (נייר חלול או צלופן) עם גודל של 6x8 ס"מ. על קצה החופשי של הנייר, את השם, ראשי תיבות של הנסקר ואת התאריך של אוסף הדם נכתבים. נייר בסרום מוגן מפני אור שמש ישיר ולהשאיר בטמפרטורת החדר עד למחרת. סרום מתייבש בצורה של מעגלים קטנים של סרט זגוגב צהבהב מבריק. לאחר מכן, רצועות הנייר עם סרום מיובש הם קרוש כמו אבקת בית מרקחת ומתייחסים למעבדה, המציינים את האבחון ועל מה המטרה נחקרת.

התנגדות סריקה

מחלק (2% או יותר) חולים עם עגבת, למרות הטיפול האנטי-ליברלי המלא, יש האטה (היעדרות) של שליליות של תגובות סרולוגיות לאחר סיום הטיפול עד 12 חודשים ועוד. יש מה שנקרא התנגדות סרולוגית, אשר בשנים האחרונות התבוננו לעתים קרובות. להבחין בין צורות של התנגדות סרולוגית:

נָכוֹן (מוחלט, ללא תנאי) - יש צורך לבצע טיפול אנטי-סיליקון נוסף, המשלב עם טיפול ספציפי כדי להגדיל את הכוחות החיסוניים של הגוף.
קרוב משפחה - לאחר טיפול מלא, טופס החיוור טופס ציסטות או טפסים, אשר נמצאים בגוף במצב כושל וכתוצאה מכך, טיפול נוסף אינו משנה את האינדיקטורים של תגובות סרולוגיות, במיוחד שונית ריב.

במקביל, ציפורים משמעותיות מתרחשות תהליכי החליפין, ואת פגזי ציפורים הם חלבון זר (אנטיגן). להגנתו, הגוף מייצר אנטים ספציפיים, אשר חיוביים או חיוביים בחדות כאשר התגובות הסורולוגיות נקבעים, היעדר ביטויי המחלה. עם L-FORS, תהליכים חילופי מופחתים יותר ואין תכונות אנטיגניות נעדרות או באה לידי ביטוי. נוגדנים ספציפיים אינם מיוצרים או בכמויות קטנות, תגובות סרולוגיות חיוביות או שליליות חלשות. פרק הזמן הגדול יותר מרגע ההדבקה, כך גדל כמות הטרופוניה החיוורת הופכת לצורות הישרדות (ציסטות, סכסוכים, צורות, דגנים), שבהם טיפול אנטי חומצי אינו יעיל.

Pseudo- ניטור - לאחר הטיפול, למרות התגובות הסרולוגיות החיוביות, הטרפונמה החיוורת נעדרת בגוף. אין אנטיגן בגוף, אבל ייצור נוגדנים נמשך, אשר נקבעים בגיבוש של תגובות סרולוגיות.
התנגדות סרולוגית יכולה לפתח כתוצאה:

טיפול פגום מבלי לקחת בחשבון את המגבלות והשלבים של המחלה;
מינון מספיק, ובמיוחד, בשל המסה הבלתי מתקבלת על הדעת של הגוף של חולים;
הפרעות אינטרוול בין כניסתה של תרופות;
שימור בגוף של טרפונאם חיוור למרות הטיפול הספציפי המלא, בשל ההתנגדות שלהם פניצילין וסמים כימותרפיים אחרים במקרה של השוון, מואשמים בנגעים באיברים הפנימיים, מערכת העצבים, בלוטות לימפה שאינן מותרות לאנטיבקטריאלי תרופות (לעתים קרובות Treponams חיוור נמצאים ברקמות של צלקת לאחר שנים רבות לאחר סוף הטיפול, בלוטות הלימפה ניתן לפעמים לזהות פלוטרים חיוורים 3-5 שנים לאחר טיפול אנטי סיליקון);
הפחתת כוחות המגן מתי מחלות שונות ואת שיכרון (אנדוקרופית, אלכוהוליזם, התמכרות לסמים, וכו ');
תשישות כללית (ארוחה על ידי ויטמינים עניים, חלבונים, שומנים).

בנוסף, חיוביות שווא של תגובות סרולוגיות מזוהה לעתים קרובות, לא קשור לנוכחות של חולי עגבת וגרמה:

ליווי מחלות ספציפיות של איברים פנימיים, הפרות של מערכת לב וכלי הדם, שיגרון, תפקודיה של מערכות אנדוקריניות ועצבנות, דרמטוסים כרוניים חמורים, ניאופלזמות ממאירות;
נגעים של מערכת העצבים (פציעות חמורות, זעזוע מוח, פציעות נפשי);
הֵרָיוֹן; שיכרון כרוני אלכוהול, תרופות ניקוטין; מחלות מדבקות (מלריה, שחפת, הפטיטיס ויראלי, דיזנטריה, מהיר, בטן וחוזר בחזרה).

גורמים אלה יכולים להשפיע תגובה אימונולוגית הגוף הוא גם בתקופה של פיתוח פעיל של גילויי עגבת ובמהלך רגרסיה שלהם. תוכן עניינים:

שיטות ישירות

מיקרוסקופיה בשדה חשוך

Treponami חיוור לא יכול לגדול על חומרי הזנה ואינם דמיינו תחת מיקרוסקופ אור. מאז גילוי הפתוגן הוא בלתי אפשרי באמצעות מיקרוסקופיה קונבנציונלית, מיקרוסקופ מיוחד עם שדה כהה משמש, שבו הסוכן הסיבתי גלוי בצורת ספירלה על רקע כהה.

עבור מיקרוסקופיה, Biomaterial סגור עם להתמקד חשוד. מיקרוסקופיה בשדה החשוך היא שיטה אפשרית אומדנים של נגעים בעור, כגון Shankre של עגבת ראשונית או קונדילום של עגבת משנית. אם החומר של המיקוד המקולופי הוא יבש, לחקור לשאוב של הצומת הלימפה.

התוצאה השלילית אינה נכללת את התהליך הפתולוגי, גילוי סטטיסטי של הפתוגן אפשרי רק ב -80%.

אבחון PCR.

התגובה המיועדת לגידול חוזר בדנ"א של Treponém החיוור מאפשרת לנו להסיק על הזיהום עם עגבת או היעדרותו.

Biomaterial לניתוח יכול להיות כל: דם, התוכן של hyphilide, נוזל השדרה, וכו 'הבדיקה מתאימה לתקופת הדגירה.

PCR הוא ספציפי לחלוטין.

ניתוחים סרוגולוגיים עקיפים בעגבת: Treponem ובדיקות לא מסודרות

ניתוחים סרולוגיים (CER או קומפלקס תגובה סרולוגית) נחשבים בדרך הנפוצה ביותר לאבחן את כל השלבים של עגבת. להקצות את התגובות הבאות:

התגלויות;
prepitations;
immunofluorescence;
ניתוח אנזים אימונו, וכו '

ניתוחים surgeical על עגבת הם מחולקים לתוך treponem ולא מרוצה.

ללא מסגרת

בחשוד בעגבת הנרכשת, מבוצעת בדיקות הקרנה, שעבורו הן משתמשות בדיקות חסרות מסגרת הגדרת נוגדנים לאנטיגנס לי ליפואט או לפתוגן במגוון שינויים. בפדרציה הרוסית, התגובה של microprocipitation (RMP), אשר מאפשר לך לזהות נוגדנים פגום על ידי תאים פתוגן בדם. האותנטיות של ההקרנה גבוהה, אך הספציפיות היא קטנה, כך בדיקה מתאימה לבחינה המונית העיקרית במטרות מונע.

הרגישות של בדיקות אקספרס מוערכת ב -78-86% כדי לזהות עגבת ראשונית, 100% עבור עגבת משנית ו 95-98% עבור גילוי של עוף שלישוני.

ספציפיות - מ 85-99%, לפעמים פחות, אשר נמצא במדינות הבאות:

gestration;
וֶסֶת;
אונקולוגיה;
מחלות רקמות חיבור;
מחלות ויראליות;
מחלת כבד;
חיסון;
"טרי" אותם;
כותרת רירסתית, וכו '

בנוסף, עודף שומן בתזונה, את השימוש של משקאות המכילים אלכוהול וקבלה של כמה תרופות יכול להוביל מסקנות חיוביות שווא.

תוצאות בדיקת ההקרנה להיות חיובי לאחר 1-2 שבועות לאחר היווצרות של Shankra. בדיקות חסרות מסגרת לתת תגובה שלילית לאחר זמן מה לאחר הטיפול. במצב ה- HIV ניתן לזהות נוגדנים לא מתחדשים במשך זמן רב, לפעמים לאורך כל החיים (שאושר על ידי תוצאות המחקר האקראי המתאים).

זנים אחרים של בדיקות מיותרים: VDRL, מבחן פלזמה קסם (RPR), מדגם עם טולידין אדום, משלימים תגובה מחייב עם קרדיוליפין אנטיגן (RSCK).

תגובת וושמן (RW)

שילוב של השלמה - התגובה של המערכת החיסונית לזיהום, התוצאה משתנה מן השלילית (קבוצה "-", כדי חיובי חדה "+ + +" או 4 פלוס.

בשלב הראשוני של סאביס ראשי RW שלילי.

Tremponen

בשל האפשרות של תוצאות חיוביות שווא, כדי לאשר כל תוצאה חיובית או מפוקפקת של ניתוח לא מתחדשת, להשתמש בדיקות trempon:

תגובת immunofluorescence (שונית);
hemagglutination (RPGA),
ניתוח ImmunoSimenal (Elisa) עבור immunoglobulins של Class G (IGG) ו immunoglobulin M (IGM);
immunoblotting;
RICT / RIT (תגובה של immobilization של treponam חיוור).

בדיקות tempons אינם משמשים כדי להעריך את האפקטיביות של הטיפול.

שונית על ההגדרה של Treponine בכיתה IGG משמש לאחר תוצאה חיובית של בדיקות אקספרס (84% רגישות עבור סאביס ראשוני ו 100% בשלבים אחרים, ספציפיות 96%). לאבחון, תינוקות אינם ישימים.

כמה מעבדות להשתמש "הפוכה" הקרנה מחקר.

CDC (מרכזים לבקרת מחלות ומניעה, ארה"ב) ממליץ על מחקרים מסורתיים, עם אימות בדיקות כמותיות לא מתחדשות, תוצאה חיובית הטיפול מתבצע.

תגובת immunofluorescence (שונית)

בסרום מוחל על החומר המורכב עם נוגדנים fluorochroma שכותרתו ספציפיים אנטיגן Treponam החיוור, הפתוגן מושך מתחמי החיסון לעצמו, ולכן זה מתחיל זוהר במיקרוסקופ זוהר.

Passive Hemoagglutination או תגובת RPGA

לפני הופעתה של hemagglutination (הדבקה), אריתרוציטים מרגע ההקדמה של Treponema חיוור צריך לעבור לפחות 4 שבועות.

הוכיחו אריתרוציטים עם שברי פתוגנים קבועים אינטראקציה עם פלזמה, אם יש נוגדנים לעגבת, מתרחשת התגובה.

מתאים לאישור שלב כלשהו של המחלה.

Assay immunosorbent מקושר

התגובה מבוססת על נוגדן האנטיגן. נוגדנים של שיעורים שונים מזוהים, אשר ניתן לכמת.

התוצאות שהתקבלו מאפשרות לנו לשפוט את משך התהליך הפתולוגי, את הצלחת הטיפול, מעמד אימונולוגי, פעילות הפתוגנים.

ImmunoBlotting הוא מגוון של אליסה, המשמש לאבחון מעמיק עם כל התוצאות המפוקפקות.

רגישות וספציפיות קרובה ל -100%, כיום השיטה הרגישה של אולטרה של זיהוי חלבונים.

Ribt.

השיטה מבוססת על תגובת נוגדן אנטיגן. אנטיגן משרת טרפונים חיוורים מעובדים בבדיקות ארנבת. כאשר אינטראקציה עם נוגדנים של אדם נגוע, פתוגנים לאבד ניידות. התגובה נאמדת על ידי מיקרוסקופיה בתחום כהה.

הערה

Ribt מוחל כיום בשל שיקול העבודה פחות לעתים קרובות, אבל ניתוח יכול להיות שימושי עבור פתרון בעיות שנויות במחלוקת ( תגובות חיוביות שווא על עגבת).

אבחנה דיפרנציאלית

המורכבות הגדולה ביותר היא אבחנה של עגבת שלישוני, הנגרמת על ידי סימפטומים ממערכת הלב וכלי הדם והעצבים, כמו גם ביטויים של העור.

יש לבחון את המטופלים.

אנו רשמים את המחלה שבה הם מתבצעים אבחנה דיפרנציאלית במהלך עגבת:

ביטויים דרמטולוגיים;
יבלות באברי המין ();
דונובנוזה;
לימפוגנול ונסיק;
נגיף;
פַּטֶלֶת.

היכן מתחיל האבחנה של עגבת

בתחילה היא שיחה עם מטופל, שבמהלכם צוין הפרטים: כאשר היה מגע מיני חשוד ומה התלונות.

לאחר איסוף anamnesis, הם עוברים לבדיקה פיסיקלית, תשומת לב מיוחדת משולמת לאזור של איברי המין ופי הטבעת, קרום ריריים נודלס הלימפה. אבחון ראשוני כבר יכול להיות מותקן. אימות סופי מתרחשת בדיקות מעבדה.

אם אתה רק אומר על המתחם, אז כמה ניתוח לזהות את הסוכן הסיבתי של עגבת, בעוד שאחרים משקפים את תגובת הגוף למבוא של treponama חיוור.

כדי להתקין את האבחון הסופי של RPGs, 1 צריך להיות משלים על ידי 1 treponem ו 1 ניתוח לא ריק.

אבחון של עגבת נשים בהריון

מחקר חובה על עגבת מתבצע מספר פעמים במהלך ההריון.

הכיוון לניתוח של CCR מונפקת במהלך הביקור הראשון של האישה בהתייעצות, ובמהלך ההריון שלוש פעמים הסקר מבוצע. חולים מקבוצת סיכון גבוהה עם היסטוריה דמיונית:, חקווי, תלוי וכו 'דורשים תשומת לב מיוחדת.

אם תוצאות הניתוח הן חיוביות, לבצע אבחון עמוק יותר, ועל פי העדות, הטיפול נקבע, אשר תלוי בבמה ובתופעות קליניות.

אבחנה של חטפיליסה מולדת

רוב הילדים נולדים באמהות לא מטופלות, או צובר טיפול מאוחר מדי.

בדיקות Tremponium באמצעות סרום ניאונטליים אינם מומלצים בשל העברה פסיבית של נוגדנים IGG. יש לבחון את כל הילדים שנולדו מאמהות עם עגבת באמצעות בדיקה סרסולוגית לא נכנסה (RPR או VDRL), המבוצעות באמצעות סרום תינוקות.