Pojem „pyrogén“ pochádza z gréckeho „pyreto“ - horúčka. Pyrogény sú látky, ktoré môžu spôsobiť zvýšenie telesnej teploty. Pyrogénna reakcia môže byť spôsobená látkami veľmi odlišnej povahy a rôzneho pôvodu. Medzi pyrogény patria gramnegatívne baktérie a ich toxíny, grampozitívne baktérie a ich toxíny, vírusy a ich metabolické produkty, ako aj steroidy atď. V oblasti kontroly kvality injekčných liekov má praktický význam bakteriálne endotoxíny,ktoré sú fragmentmi vonkajšej steny gramnegatívnych baktérií.
Gramnegatívne baktérie majú dvojvrstvovú bunkovú stenu, ktorá obklopuje cytoplazmatickú membránu. Prvá vrstva je veľmi tenká (1 nm silná) nelipidová membrána zložená z peptidoglykánu. Hovorí sa mu aj glykopeptid alebo mukopeptid. Je to komplexná matrica obsahujúca polysacharidové reťazce navzájom spojené zosieťovaním z krátkych peptidových reťazcov. Druhou vrstvou bunkovej steny je lipidová membrána s hrúbkou 7,5 nm. Práve na tejto vonkajšej membráne sa nachádzajú endotoxíny (lipopolysacharidy). Molekuly endotoxínu poskytujú štrukturálnu integritu, sú zodpovedné za mnoho fyziologických funkcií, vrátane patogénnych a antigénnych vlastností baktérií. Štrukturálne je molekula endotoxínu rozdelená do troch častí - Lipid A, Cor a O-špecifický reťazec. 
O-špecifický reťazec Cor Lipid A
Lipid A Pozostáva z disacharidu, fosfátu a mastných kyselín. Mastné kyseliny, ktoré tvoria lipid A, môžu byť nasýtené alebo nenasýtené. Lipid A najčastejšie obsahuje kyseliny: palmitovú, laurovú, glutámovú, meristickú. Oblasť lipidu A je najkonštantnejšou oblasťou molekuly LPS a jej štruktúra je u mnohých baktérií podobná.
O-špecifický reťazec lipopolysacharidy sú vyrobené z opakujúcich sa oligosacharidov. Najbežnejšie cukry v O-špecifickom reťazci sú glukóza, galaktóza a ramnóza. Táto časť molekuly jej dodáva hydrofilné vlastnosti, vďaka ktorým sú LPS ľahko rozpustné vo vode. Polysacharidová časť je naj variabilnejšou časťou molekuly LPS. Tento fragment molekuly sa často nazýva O-antigén, pretože je to on, kto je zodpovedný za antigénnu aktivitu gramnegatívnych baktérií.
Cor - centrálna časť molekuly, ktorá viaže O-antigén na lipid A. Štruktúra kôry je formálne rozdelená na vonkajšiu a vnútornú časť. Vnútorná časť mozgovej kôry zvyčajne obsahuje zvyšky L-glycero-O-mannoheptózy a kyseliny 2-keto-3-deoxyoktónovej (KDO). BWW obsahuje 8 atómov uhlíka a prakticky sa nenachádza nikde inde v prírode.
Okrem lipopolysacharidov sú proteíny obsiahnuté aj vo vonkajšej stene gramnegatívnych baktérií (vonkajšia membrána pozostáva zo ¾ LPS a iba ¼ je zložená z bielkovinových zložiek). Tieto proteíny spolu s LPS tvoria proteín-lipopolysacharidové komplexy rôznych veľkostí a molekulových hmotností. Práve týmto komplexom sa hovorí bakteriálne endotoxíny. Purifikované prípravky, ktoré sa používajú ako štandardy, neobsahujú peptidové fragmenty a predstavujú čistý lipopolysacharidový prípravok. Termín „bakteriálne endotoxíny“ sa však rovnako dobre používa na prírodné endotoxíny nachádzajúce sa v roztoku v dôsledku deštrukcie baktérií a na čisté LPS prípravky.
Vonkajšia stena jednej gramnegatívnej baktérie môže obsahovať až 3,5 milióna molekúl LPS. Po jej smrti sa všetci dostanú do riešenia. Endotoxíny gramnegatívnych baktérií zostávajú biologicky aktívnymi molekulami aj po smrti baktérií. Molekula endotoxínu je teplotne stabilná a ľahko odolá sterilizačnému cyklu v autokláve. Malá veľkosť molekúl endotoxínu im umožňuje ľahký prechod cez membrány používané na sterilizáciu roztokov (0,22 μm). Preto môžu byť endotoxíny prítomné v hotových dávkových formách, dokonca aj v tých, ktoré sú vyrobené za aseptických podmienok a terminálne sterilizované.
Bakteriálne endotoxíny sú mimoriadne aktívne (silné) pyrogény. Na vznik febrilného záchvatu je dostatočná prítomnosť bakteriálnych endotoxínov v infúznom roztoku v koncentrácii 1 ng / ml (asi 10 EU / ml). Ostatné pyrogény sú menej aktívne a pre vývoj pyrogénnej reakcie musí byť ich koncentrácia 100–1 000-krát vyššia. Pojmy „pyrogény“ a „endotoxíny“ sa zvyčajne používajú zameniteľne a hoci nie všetky pyrogény sú endotoxíny, najvýznamnejšie sú endotoxíny gramnegatívnych baktérií.
ENDOTOXÍN (LPS) V PATOGENEZE ATHEROSKLERÓZY
Yu.V. Konev, L. B. Lazebnik
GUZ Ústredný vedecký výskumný ústav gastroenterológie, Moskva DZ
Konev Jurij Vladimirovič 111123, Moskva, diaľnica Entuziastov, 86 E-mail: gastroen [chránené e-mailom] ru
Moderné údaje o procesoch, ktoré sú základom aterogenézy, naznačujú významnú úlohu endotoxínu (lipopolysacharid - LPS) črevnej mikroflóry pri vývoji vaskulárnych lézií. V práci je zhrnutá literatúra a výsledky nášho vlastného výskumu týkajúceho sa účasti LPS gramnegatívnych baktérií na iniciácii a progresii aterosklerózy. Bolo dokázané, že LPS gramnegatívnych baktérií interaguje s TLR4, čo spúšťa cytokínovú kaskádu nasledovanú tvorbou aterómu.
Kľúčové slová: endotoxín; LPS; ateroskleróza; aterogenéza; TLR. ZHRNUTIE
Posledné údaje o procesoch, ktoré sú základom aterogenézy, naznačujú významnú úlohu endotoxínu (lipopolysacharid - LPS) črevnej mikroflóry pri vývoji vaskulárnych lézií. Tento príspevok sumarizuje literárne a materiálne výsledky ich výskumu týkajúceho sa účasti baktérií LPS gramnegativnyh na iniciácii a progresii aterosklerózy. Dokazujeme, že LPS gramnegatívnych baktérií interaguje s TLR4, spúšťa cytokínovú kaskádu s následnou tvorbou aterómu. Kľúčové slová: endotoxín; LPS; ateroskleróza; aterogenéza; TLR.
V súčasnosti počet úmrtí na aterosklerózu významne prevyšuje počet úmrtí na iné choroby. Ischemická choroba srdca, hypertenzia, ischemické poškodenie mozgu, chronická ischémia dolné končatiny, chronická ischemická choroba tráviaceho systému - nejde o úplný zoznam závažných ochorení, ktoré sú založené na aterosklerotických léziách cievnej steny. Patogenéza aterosklerózy je zložitá a rôznorodá a v procese involúcie sa prudko zvyšuje frekvencia a intenzita rizikových faktorov, čo určuje vysoký výskyt aterosklerózy u ľudí starších vekových skupín. Niektoré všeobecné biologické mechanizmy, ktoré sú základom nástupu aterosklerotického procesu, však nie sú dobre známe.
V súčasnosti je najrozšírenejšou pozíciou, že ateroskleróza je chronické ochorenie, ktoré je založené na poškodení endotelu a tvorbe vláknitých aterosklerotických plátov v arteriálnej stene.
doteraz napriek navrhovaným možnostiam nie je dôvod, ktorý spúšťa mechanizmus tvorby aterosklerotických plátov, dostatočne jasný. Posledné štúdie naznačujú možnosť účasti na týchto procesoch endotoxínu, ktorého nadmerná tvorba je podporovaná dysbiotickými zmenami v čreve, ktoré sa často vyskytujú v starobe a starobe.
Endotoxín je lipopolysacharid (LPS), ktorý je súčasťou vonkajšej membrány bunkovej steny gramnegatívnych baktérií. veľký rozsah odlišné typy biologická aktivita.
Normálne iba malé množstvo LPS vstupuje do krvi z ľudského hrubého čreva, pretože človek má množstvo humorálnych a bunkových faktorov, ktoré viažu LPS: lipoproteíny s vysokou špecifickou hustotou, protilátky, najmä protilátky proti glykolipidu chemotypu Re, Kupfferove bunky, polymorfonukleárne leukocyty a makrofágy. Až donedávna sa verilo, že za fyziologických podmienok LPS preniká z čreva
iba do portálnej žily, kde ho zachytávajú hlavne Kupfferove bunky, posledné štúdie však ukazujú, že endotoxín sa nachádza v malom množstve u zdravých ľudí, ba dokonca aj u novorodencov v systémovom obehu, v krvnej plazme a na povrchu polymorfonukleárnych leukocytov. Normálne fungujúce anti-endotoxínové faktory poskytujú pomerne účinnú obranu tela pred škodlivými účinkami pôsobenia LPS za fyziologických podmienok. Situácia sa však výrazne mení pri strese, vystavení prenikajúcemu žiareniu a iným environmentálne škodlivým faktorom, rôznym chorobám infekčnej a neinfekčnej genézy. Za týchto podmienok sa zvyšuje nielen penetrácia LPS do systémového obehu, ale sú vyčerpané aj faktory antiendotoxínovej imunity. Zároveň sa prudko znižujú titre protilátok proti glykolipidu chemotypu Re, ktoré neutralizujú endotoxín, a obsah PMN, ktoré sa viažu na LPS in vivo v krvi. PMN schopné viazať LPS in vitro tiež prakticky zmiznú. Inými slovami, rezervy väzby LPS protilátkami a granulocytmi zmiznú a telo sa stáva takmer úplne bezbranným proti opakovaným útokom LPS vstupujúcim do krvi.
Primárne resp počiatočné fázy systémové účinky endotoxínu sú dôsledkom interakcie LPS s rôznymi krvnými bunkami a tkanivami, ako aj s krvnými lipoproteínmi. Z buniek, ktoré prijímajú endotoxín, sú hlavnými účastníkmi a induktormi účinku endotoxínu endotelové bunky, krvné doštičky, makrofágy, neutrofily, bazofily, žírne bunky, hepatocyty, čo naznačuje absenciu selektívnej väzby endotoxínu bunkami.
Je potrebné poznamenať, že významná časť endotoxínu sa transportuje do orgánov a tkanív v kombinácii s lipoproteínmi s nízkou hustotou (LDL) a fixácia endotoxínu na rôzne krvné bunky, mezenchým a orgánovo špecifické prvky je do značnej miery dôsledkom prítomnosti Toll- podobného typu (TLR).
Aktívne bunkové prijímanie LPS v tele vysvetľuje jav disociácie medzi javmi so stredným obsahom LPS a „agresiou endotoxínu“, keď pri nízkom obsahu cirkulujúceho endotoxínu v krvi dôjde k šokujúcemu vývoju charakteristického obrazu endotoxínovej kaskády.
Eliminácia endotoxínu zo systémovej cirkulácie je dvojfázová: po rýchlej adsorpcii LPS na krvné bunky sa ukladá hlavne v pečeni a v oveľa nižších koncentráciách v slezine, črevách, pľúcach a obličkách, po ktorých nasleduje ich poškodenie s účasťou cytokínov.
V ranom období "agresie endotoxínov", nárast tvorby akútnej fázy
proteíny: C-reaktívny proteín, transferín, kyselina-a1-glykoproteín, haptoglobín, IL-6, čo koreluje so závažnosťou endotoxinémie. A samozrejme, proteíny akútnej fázy sa aktívne podieľajú na väzbe a inaktivácii prebytočného endotoxínu.
Eliminácia endotoxínu zo systémovej cirkulácie je zabezpečená prítomnosťou protilátok proti determinantom LPS jadra, ako aj neimunoglobulínových inhibítorov. Bol zaznamenaný výrazný detoxikačný účinok vysokých dávok heparínu, ktorý aktivuje lipoproteín lipázu, ktorá následne ničí LPS.
Existujú správy o účasti lyzozýmu, interferónu, makroglobulínov, termolabilného sérového inaktivátora s aktivitou esterázy, fosfatáz, komplementu, proteínu v α-globulínovej frakcii krvi so sedimentačnou konštantou 4,5 v detoxikačných procesoch LPS v krvi.
Lipoproteíny s vysokou špecifickou hustotou, schopné vytvárať stabilný komplex s LPS, hrajú určitú úlohu v endotoxínovej väzbovej aktivite krvnej plazmy.
Detoxikácia a degradácia LPS v bunkách sa uskutočňuje za účasti rôznych enzymatických systémov: lipoxygenázy, fosforylázy, deacetylázy, defosforylázy.
Napriek tomu je známe, že hlavnými krvnými bunkami prijímajúcimi LPS sú polymorfonukleárne leukocyty (PMN), makrofágy a krvné doštičky. Zistilo sa, že v priebehu 1 - 2 minút po injekcii endotoxínu obsahuje asi 40% PMN na svojom povrchu endotoxín. Do 30. minúty sa PMN obsahujúce endotoxín izolujú v mikrovaskulatúre pľúc, pečene, obličiek, sleziny a v menšej miere aj v nadobličkách, čo vedie k ich poškodeniu. orgánov. Zistilo sa, že sekvestrácia neutrofilov v pľúcach stimulovaná endotoxínom nie je spojená so zvýšenou produkciou PAF a tromboxánu A2, ale je dôsledkom zvýšenej produkcie L-selektínu.
30-60 minút po podaní endotoxínu Sl. typhi murium, králiky vykázali pokles aktivity myeloperoxidázy a hladinu katiónových proteínov v PMN, pričom dosiahli maximum za 3 hodiny.
Nepriamo, prostredníctvom zvýšenia produkcie fibro-nektínu, zvyšuje salmonella endotoxín chemotaktickú, adhéznu aktivitu neutrofilov, zvyšuje zníženú hladinu a znižuje zvýšenú tvorbu PMN superoxidového radikálového aniónu.
Komplexná dynamická interakcia krvných systémov viažucich endotoxíny a endotoxínu určuje intenzitu vývoja zmien reologických vlastností krvi, hemostázy a mikrocirkulácie pri systémovej endotoxinémii.
Väzba endotoxínu makrofágmi, PMN na jednej strane vyvoláva vývoj komplexu ochranných reakcií a na druhej strane produkciu cytokínov a deštrukciu rôznych orgánov a tkanív sprostredkovanú cytokínmi.
Tak napríklad endotoxín (LPS), zložka vonkajšej membrány gramnegatívnych baktérií, interaguje s proteínom viažucim LPS (LBP) a je transportovaný do pečene. Pečeňové makrofágy (hviezdicovité retikulocyty) a monocyty sa aktivujú a uvoľňujú zápalové mediátory. Toto je nevyhnutná podmienka pre rozvoj syndrómu systémovej zápalovej odpovede (SIRS).
LPS môže nasledujúcim mechanizmom prispievať k rozvoju dysfunkcie črevnej bariéry. LPS vo vysokých koncentráciách priamo aktivuje bunky CD14 črevného endotelu, čo vedie k strate endotelovej integrity.
Dôležitú úlohu v aterogenéze zohráva chronický zápalový proces, ktorý spôsobuje vývoj alterácie a proliferácie buniek endotelu a hladkého svalstva cievnej steny a aktiváciu makrofágov lokalizovaných v intimách tepien. Aktivované makrofágy v nadmernom množstve absorbujú cholesterol z lipoproteínov s nízkou špecifickou hustotou a vo výsledku sa menia na penové bunky, ktorých vzhľad je jedným z prvých príznakov tvorby ateroómu.
Jedným z mechanizmov pôsobenia endotoxínov je endoteliálna dysfunkcia. Najmä endotelová dysfunkcia by sa mala označiť za hlavnú príčinu smrti pacientov niekoľko rokov po peritonitíde.
Bez ohľadu na príčinu sú vedúce odkazy v patogenéze endotelovej dysfunkcie v rôzne patológie dysbióza, nadmerný príjem endotoxínov do portálneho a systémového obehu, poruchy metabolických funkcií pečene a systémová zápalová odpoveď. Tvoria uzavretý patologický systém, ktorého hlavným cieľom je endotel, vrátane sínusoidov retikuloendoteliálneho systému pečene.
Obrázok: 1. Patogenéza poškodenia cievnej steny počas agresie endotoxínu
bunkové receptory CD14 umiestnené na membránach makrofágov, polymorfonukleárnych leukocytov, endotelových buniek, aktivuje ich, stimuluje produkciu cytokínov a ďalších mediátorov zápalovej reakcie týmito bunkami - komplement, vazoaktívne mediátory, metabolity kyseliny arachidónovej, adhezíny, kiníny, faktory aktivácie krvných doštičiek, krvné doštičky, endotelové bunky, , koagulačné faktory, aktívne kyslíkové radikály a oxid dusnatý (NO). Tento mediátor je vybavený hlavnými patologickými schopnosťami pri tvorbe endotelovej dysfunkcie vo všetkých situáciách.
Syntetizovaný NO má autokrinné aj parakrinné účinky, to znamená, že ovplyvňuje metabolické procesy v bunkách samotných aj v bunkách nachádzajúcich sa v blízkosti. Bunkovými cieľmi NO sú železo obsahujúce enzýmy a proteíny (guanylátcykláza, NO syntetáza, mitochondriálne respiračné enzýmy, enzýmy Krebsovho cyklu, enzýmy syntézy proteínov a DNA); proteínové SH-skupiny atď. Väzbou na kyslík vytvára NO extrémne toxické zlúčeniny - peroxynitrity. Tvorba NO a L-cirulínu je katalyzovaná enzýmom syntetázou (NOS) z L-arginínu. Sú známe tri typy NOS: neurónový (nNOS), endoteliálny (eNOS) a indukovateľný (iNOS). Za fyziologických podmienok syntézu NO zabezpečujú syntetázy nNOS a eNOS a syntéza iNOS sa zvyšuje iba v reakcii na patogénne podnety: expresia génu iNOS je indukovaná IL-1, interferónom-y, TNF-a a endotoxínom gramnegatívnych baktérií. Za fyziologických podmienok tieto
mechanizmy zahŕňajúce NO používajú makrofágy na ničenie nádorových buniek, ktoré nielenže sami produkujú NO, ale tiež vylučujú TNF-a, čím v nich indukujú syntézu iN0S. Okrem pro-apoptotickej úlohy je aktivácia iN0S dôležitá pre udržanie imunity pri akútnych a chronických zápaloch.
Obmedzenie patologického pôsobenia NO a jeho inaktivácia sa uskutočňuje pomocou superoxidového radikálu О2, ktorého zvýšenie produkcie v r. obehový systém fagocytárne alebo endotelové bunky súčasne vyvolávajú spazmus a sú základom pre vývoj následnej ED. Oxidované a glykozylované formy lipoproteínov s nízkou hustotou (LDL) majú podobný účinok; inhibujú eNOS v makrofágoch a endotelových bunkách.
Mechanizmy škodlivého účinku endotoxínu na endotelové bunky sú však zjavne nedostatočné. Táto činnosť je samozrejme sprostredkovaná prostredníctvom polymorfonukleárnych leukocytov. V súčasnosti je známych niekoľko typov interakcie LPS s PMN a makrofágmi: a) LPS sa viaže na receptorový proteín CD18 a takéto viazanie nie je potrebné na aktiváciu leukocytov;
b) LPS sa najskôr viaže na plazmatický proteín LBP a potom v kombinácii s týmto proteínom reaguje s receptorom CD14, čo vedie k aktivácii leukocytov;
c) nešpecifická interakcia LPS s bunkovými membránami. K tomu by sa malo pridať opísané Fc-závislé viazanie LPS na bunky vystužené anti-endotoxínovými protilátkami. Príspevok týchto druhov väzby k projektívnemu a
patogenetická úloha granulocytov ešte nebola študovaná. Výsledok interakcie LPS s leukocytmi a vlastnosti PMN indukovaných LPS zjavne závisia od koncentrácie endotoxínu: pri relatívne nízkych koncentráciách dochádza k aktivácii a pozitívnemu (fyziologickému) účinku, pri vysokých koncentráciách - hyperaktivácii, preťaženiu leukocytov endotoxínom a patologickému účinku (vývoj organopatológie) ). Keď sú leukocyty hyperaktivované a zničené, do životného prostredia sa uvoľňuje veľa enzýmov, najmä elastáza a ďalšie lyzozomálne enzýmy, ktoré môžu mať škodlivý účinok na endotelové bunky.
Naše štúdie umožnili dokázať, že krv osôb starších vekových skupín obsahuje pomerne vysoké titre antiglykolipidových protilátok. Skutočnosť, že s pribúdajúcim vekom sa titer protilátok prakticky nezmenil, naznačuje, že syntéza vlastných protilátok proti endotoxínu sa zachováva v involučnom veku, čo tiež nepriamo potvrdzuje univerzálny účinok endotoxínu na ľudský organizmus.
Okrem toho sme u starších ľudí s príznakmi aterosklerózy objavili fenomén oslabenia granulocytovej väzby antiendotoxínovej ochrany. Pri skúmaní krvných náterov pomocou LPS testu sa zistila takmer úplná absencia nielen rezervy väzby endotoxínu granulocytmi, ale aj nedostatočná hodnota alebo úplná absencia LPS-pozitívnych leukocytov v krvi. Väzba endotoxínu na granulocyty je veľmi dôležitým článkom v antiendotoxínovej ochrane a funkcii eliminácie LPS. Okrem toho prijatie endotoxínu granulocytmi spôsobuje aktiváciu antimikrobiálneho potenciálu týchto buniek a je dôležitým článkom v celkovej antibakteriálnej rezistencii organizmu ako celku. Zníženie natívnych LPS-pozitívnych PMN v systémovom obehu osôb starších vekových skupín je zjavne dôsledkom určitej vekovej menejcennosti tejto populácie buniek, ktoré, ako je známe, plnia funkcie prvej antibakteriálnej bariéry. Pravdepodobne práve táto okolnosť vysvetľuje náchylnosť organizmu osôb starších vekových skupín na nepriaznivý priebeh komplikácií aterosklerózy, najmä bakteriálnych infekcií.
Pokles LPS-pozitívnych granulocytov vo všeobecnom prietoku krvi osôb starších vekových skupín za prítomnosti dostatočne vysokých titrov antiglykolipidových protilátok naznačuje podľa nášho názoru určitú neschopnosť PMN u starších a starších ľudí všeobecne viazať Fc (tj. Iné antigény) , čo samozrejme naznačuje určitú vekovú „defektnosť“ systému polymorfonukleárnych leukocytov u osôb involučného obdobia.
Pod vplyvom nadbytku endotoxínu v leukocytoch sa tiež aktivujú enzýmy peroxidácie lipidov, ktorých konečné produkty môžu tiež spôsobiť poškodenie endotelu.
Pôsobenie endotoxínu na endotel môže tiež zahŕňať systém komplementu, ktorý je aktivovaný endotoxínom. Konkrétne komplementová frakcia C5a interaguje s LPS.
Nakoniec je možný ďalší mechanizmus pôsobenia endotoxínov na endotel. Na povrchu endotelových buniek je fi-bronektín, ktorý hrá dôležitú úlohu v interakcii medzi bunkami a v pripojení buniek k podvrstve. Plazmatický fibronektín je antigénne identický s fibronektínom na povrchu bunky a tiež sa podieľa na bunkovom pripojení k sebe navzájom a k bazálnej membráne. Pri endotoxinémii môže byť plazmatický fibronektín zničený leukocytovými proteázami a spotrebovaný ako opsonín, čo môže viesť k jeho vylúhovaniu z povrchu endotelových buniek a ich deskvamácii. Po podaní endotoxínu sa endotelové bunky nachádzajú v krvi u 88% pokusných zvierat, zatiaľ čo pred podaním sa našli iba u 12% zdravých zvierat.
Hypotéza o možnej úlohe LPS v patogenéze aterosklerózy sa potvrdila v priebehu nedávnej a prebiehajúcej intenzívnej akumulácie a štúdia materiálov o úlohe receptorov rozpoznávajúcich obraz (ORR) v mechanizmoch vrodenej imunity. Koncept ORR ako prvý navrhol S.A. Janeway. V súčasnosti je známych niekoľko rodín OPP. Takmer všetky OPP signalizujú, rozpoznávajú hlavne cudzorodé zložky (ligandy), upozorňujú na ich príchod a začínajú kaskádu reakcií, ktoré zabezpečujú prenos signálu do bunkového jadra a začiatok syntézy množstva bioaktívnych molekúl. Receptory podobné To11 (TLR) sú v súčasnosti úplne preskúmané. Nachádzajú sa na epiteliálnych a endotelových bunkách, monocytoch a makrofágoch, polymorfonukleárnych leukocytoch, dendritických a iných bunkách, ktoré prichádzajú do styku s cudzími látkami. U ľudí je známych 10 TLR. Receptory TLR 1, 2, 4, 5, 6 a 10, ktoré rozpoznávajú povrchové zložky mikroorganizmov, sa nachádzajú na povrchu buniek, zatiaľ čo TLR 3, 7, 8 a 9, ktoré viažu štruktúry vírusových a bakteriálnych nukleových kyselín, sa nachádzajú v endoplazmatickom retikulu.
TLR hrajú veľmi dôležitú úlohu vo fyziológii makroorganizmu (obr. 2). Po interakcii s mikrobiálnymi alebo vírusovými ligandmi spôsobujú syntézu prozápalových a protizápalových cytokínov, defenzínov, stimulujú reakcie vrodených a adaptívnych
Obrázok: 2. Typy receptorov TLR (Akira et al., 2003)
imunita, zabezpečte účasť črevnej mikroflóry na udržiavaní homeostázy a náprave poškodenia epitelových buniek sliznice. Vedci v Spojených štátoch na základe nedávnych experimentov dospeli k záveru, že TLR majú minimálne dve funkcie: 1) ochranu pred infekciou a 2) udržiavanie homeostázy tkaniva.
Existuje pomerne jasne vyjadrená špecifickosť reakcií ^ B. s rôznymi štruktúrami. Hrá teda dôležitú úlohu v reakcii buniek makroorganizmov na LPS gramnegatívnych baktérií. Ďalej rozpoznáva proteín p60 tepelného šoku, fibronektínové peptidy a niektoré ďalšie zložky. vytvára diméry s a rozpoznáva peptidoglykán grampozitívnych baktérií, kyselinu lipoteichoovú, zymosan, diacyl lipopeptid, proteín p70 tepelného šoku a ďalšie štruktúry. viaže bičíky
grampozitívne a gramnegatívne baktérie. Receptory IgB3, 7, 8, 9 rozpoznávajú bakteriálnu a vírusovú DNA, vírusovú dvojvláknovú RNA a niektoré nemetylované deoxyoligonukleotidové sekvencie.
Táto špecifickosť reakcií IgB umožnila určiť ich funkcie a úlohu v patogenéze určitých patologických procesov. Takže s mutáciou v géne 1: 1r4, ktorá kóduje syntézu receptora IgB4, je reakcia na LPS zrušená, citlivosť na infekcie spôsobené gramnegatívnymi baktériami sa prudko zvyšuje, ale riziko aterosklerózy a infarktu myokardu klesá. Súčasne dochádza aj k zníženiu koncentrácie cirkulujúcich prozápalových cytokínov, fibrinogénu a rozpustných adhezínov, ktoré sa podieľajú na tvorbe aterosklerotických plátov na stenách krvných ciev a progresii aterosklerózy. Preto sa získali dôkazy o dôležitej úlohe ThB4 v patogenéze aterosklerózy, ako aj o význame LPS, jedného z hlavných ligandov ako príčinného faktora,
spustenie reakcií, ktoré môžu nakoniec spôsobiť
tvorba aterosklerotických lézií cievnej steny.
Publikácia o úlohe chlamýdiového LPS pri iniciácii aterogenézy sa objavila už v roku 1998, správy o možnej úlohe bakteriálneho LPS pri iniciácii aterosklerotických lézií sa však objavili oveľa skôr. Ukázalo sa najmä, že LPS spôsobuje endoteliálne poškodenie u pokusných zvierat. Zistilo sa tiež, že LPS z E. coli a S. typhimurium indukujú akumuláciu lipidov v makrofágoch, keď sú kultivované v prítomnosti natívnych lipoproteínov s nízkou špecifickou hustotou. Tieto materiály umožnili naznačiť vzťah medzi endotoxinémiou a aterosklerózou. Zdá sa, že tento predpoklad podporujú aj prvé klinické materiály. Dlhodobé pozorovania u pomerne veľkého počtu pacientov s ischemickou chorobou srdca ukázali, že infarkt myokardu sa vyvíjal niekoľkokrát častejšie u pacientov s vysokým obsahom endotoxínu v krvi. Vo vysokých koncentráciách bol endotoxín detegovaný aj v krvi pacientov s chronickou ischémiou dolných končatín a závažnosť klinického priebehu ochorenia korelovala s koncentráciou endotoxínu v krvi.
Od roku 1992, po štúdii BONE, sa vytvoril koncept syndrómu systémovej zápalovej odpovede (SIRS). Aj vo vyjadreniach I.I. Mečnikov poukázal na zápal, najmä jeho vaskulárnu zložku, ako na univerzálnu ochrannú reakciu. Zároveň I.I. Mečnikov zaznamenal možnosť nielen ochranného účinku proti zápalový syndróm, ale aj pred škodlivým účinkom na orgány a systémy pacienta. Teraz sa ukázalo, že SIRS sa vyskytuje nielen za všetkých extrémnych podmienok - polytrauma, ťažké infekcie, scybový syndróm, závažná hypertenzia, pankreatitída, ťažké operácie atď. Podrobnosti o syndróme systémovej zápalovej odpovede boli jasnejšie po definícii
cytokíny a identifikáciu ich funkcie. Doteraz sú známe fázy vývoja syndrómu systémovej zápalovej odpovede a zlyhania viacerých orgánov, ktoré sú do značnej miery určené endotoxínom.
Výsledok reakcie LPS s bunkami makroorganizmu závisí od jeho koncentrácie (obr. 3). Stredná aktivácia buniek a systémov pri nízkych dávkach endotoxínu vedie k rozvoju SIRS, ktorý sa prejavuje lokálnym poškodením tkaniva. S nárastom dávky na mierne zvýšenú hladinu endotoxínu sa začnú objavovať systémové reakcie vo forme reakcie na akútnu fázu a horúčky. A nakoniec vysoká hladina LPS vedie k hyperaktivácii, ktorá je sprevádzaná zvýšenou produkciou nekrotizujúceho faktora -a nádoru a množstva ďalších mediátorov, zvýšenou aktiváciou systému komplementu a faktormi zrážania krvi, čo môže viesť k rozvoju takých impozantných komplikácií, ako je diseminovaná intravaskulárna koagulácia (DIC), endotoxín šok a akútne zlyhanie viacerých orgánov.
V závislosti na dávke spôsobuje LPS poškodenie buniek alebo stimuluje syntézu mnohých fyziologicky aktívnych mediátorov, ako je endogénny pyrogén, interleukíny, faktor nekrotizujúci nádory a ďalšie.
Študoval sa vplyv syndrómu systémovej zápalovej odpovede na hemostázu a vývoj trombofilného stavu. Prejavy syndrómu systémovej zápalovej reakcie vo vzťahu k rôznym medicínskym oblastiam však neboli dostatočne študované. Terapeutická taktika zatiaľ dostatočne neodrážala patofyziologické zmeny, ku ktorým došlo počas procesu SIRS.
Posledné štúdie preukázali, že črevo hrá ústrednú úlohu v patogenéze vývoja syndrómu systémovej zápalovej odpovede - SIRS (SIRS) a jeho extrémneho prejavu - zlyhania viacerých orgánov. Črevá nie sú len orgánom zodpovedným za zásobovanie tela základnými živinami. Na udržanie celistvosti črevnej sliznice samotnej je nevyhnutná prítomnosť výživných látok. Črevo plní endokrinné, imunitné, metabolické a mechanické bariérové \u200b\u200bfunkcie. Na udržiavaní celistvosti a regenerácii slizničnej vrstvy gastrointestinálneho traktu sa podieľa veľa faktorov. Jedná sa o gastrointestinálne peptidy, enteroglukagón, tyroxín, mastné kyseliny, rastový hormón, Peyerove náplasti, lymfocyty, makrofágy, imunoglobulín A v sekrécii žlče. Črevná stena je bohato naplnená lymfoidným tkanivom, ktoré interaguje s črevnou bakteriálnou flórou a výživovými faktormi; Normálne baktérie a toxíny z črevného lúmenu v malom množstve prenikajú cez systém portálnych žíl do pečene, kde sú vylučované Kupfferovými a retikuloendoteliálnymi bunkami. Normálna mikroflóra, ktorá je symbiotická, plní množstvo funkcií, ktoré sú pre makroorganizmus nevyhnutné. Jedná sa o nešpecifickú ochranu proti baktériám, ktoré spôsobujú črevné infekcie, na základe mikrobiálneho antagonizmu a účasti na tvorbe protilátok a funkcie syntetizujúcich vitamíny z mikroorganizmov, najmä vitamínov C, K, B, B2, B6, B, PP, kyseliny listovej a
Obrázok: H. endotoxín a zápal
kyselina pantoténová. Okrem toho mikróby obývajúce črevo rozkladajú celulózu, podieľajú sa na enzymatickom odbúravaní bielkovín, tukov a vysokomolekulárnych uhľohydrátov, podporujú vstrebávanie vápniku, železa, vitamínu D, vďaka vytváraniu kyslého prostredia sa podieľajú na výmene žlčových kyselín a tvorbe sterkobilínu, koprosterolu v hrubom čreve, kyselina deoxycholová, sa podieľajú na tvorbe produktov rozkladu bielkovín (fenol, indol, skatol), ktoré normalizujú črevnú peristaltiku. Normálna bakteriálna mikroflóra podporuje „zrenie“ makrofágovo-histiocytového systému, ovplyvňuje štruktúru a absorpčnú kapacitu črevnej sliznice.
Črevná mikroflóra je rozdelená na ob-ligatívnu, fakultatívnu a prechodnú.
Povinná časť mikroflóry je neustále súčasťou normálnej flóry a určuje množstvo metabolických procesov, chráni hostiteľský organizmus pred infekciou. Nepovinná časť, ktorá sa nachádza u zdravých ľudí so zníženou odolnosťou mikroorganizmu, môže pôsobiť ako etiologický faktor choroby. Prechodná časť sa zistí spravidla náhodou, pretože nie je schopná dlhodobého pobytu v makroorganizme.
Pri interpretácii výsledkov bakteriologického vyšetrenia výkalov často vznikajú ťažkosti kvôli ich veľkým výkyvom aj u prakticky zdravých ľudí, rýchlej zmene ukazovateľov u toho istého pacienta počas opakovaných štúdií bez akejkoľvek pravidelnosti. Ďalej je známe, že mikroflóra výkalov nie vždy odráža obsah temennej, kryptovej a pravdepodobne dokonca intraluminálnej (dutinovej) črevnej mikroflóry.
Črevná sliznica sa neustále obnovuje, má vysoký stupeň metabolickej aktivity, a je tak náchylnejšia na ischémiu a atrofiu. Ak sú epiteliálne bunky zbavené nominálneho prívodu živín, potom dochádza k zníženiu aktivity reprodukcie a migrácie buniek, ako aj k syntéze DNA a funkcii črevnej bariéry.
Z tohto dôvodu obvykle iba malé množstvo LPS preniká z lúmenu čreva do krvi, pretože človek má rad humorálnych a bunkových faktorov, ktoré viažu LPS: lipoproteíny s vysokou špecifickou hustotou, protilátky, najmä protilátky proti glykolipidu chemotypu He, Kupfferove bunky, polymorfonukleárne leukocyty a makrofágy. Antiendotoxínové faktory poskytujú za fyziologických podmienok pomerne účinnú ochranu tela pred prebytkom LPS. Situácia sa však významne mení za nepriaznivých podmienok prostredia a s rôznymi chorobami, čo vedie k vyčerpaniu faktorov imunity voči antiendotoxínu. Zároveň sa prudko znižujú titre protilátok proti LPS,
obsah PMN, ktoré viažu endotoxín in vivo v krvi. PMN schopné viazať endotoxín in vitro tiež prakticky zmiznú. Rezervy väzby endotoxínov protilátkami a granulocytmi sa prudko znižujú a telo sa stáva takmer úplne bezbranným proti opakovaným útokom endotoxínov, ktoré opäť vstupujú do krvi, a realizujú sa jeho patofyziologické účinky.
Takže J. Meakins a J. Marshall v roku 1986 po prvýkrát predložili hypotézu o vývoji SIRS a MOF v dôsledku zmien v permeabilite črevnej sliznice, ktoré viedli k translokácii baktérií a toxínov do obehového systému.
Patogenéza aterosklerózy je zjavne založená na reakciách vyvolaných interakciou receptorov podobných To11 s exogénnymi a endogénnymi ligandmi. Po stimulácii receptorov podobných To11 ligandmi sa prenáša signál do bunkového jadra a aktivuje sa transkripčný faktor OT-kB, čo vedie k expresii množstva prozápalových a protizápalových cytokínov, ochranných faktorov a ďalších bioaktívnych molekúl vrátane adhéznych faktorov. Aktivácia a alterácia buniek endotelu a hladkého svalstva, aktivácia makrofágov intimy artérií a ich premena na
AGRESIA ENDOTOXÍNOV (PATOFYZIOLOGICKÉ ÚČINKY ENDOTOXÍNU)
Cieľ endotoxínu Uvoľňované látky Patofyziologické pôsobenie Klinické prejavy
Makrofágy 1b-1; TO; 1P ^ y; P-6 Aktivácia fagocytov; uvoľňovanie prostaglandínov v hypotalame; deregulácia všetkých zápalových reakcií; Horúčka vyvolaná vazodilatáciou N0; závraty; zvýšená kapilárna permeabilita, najmä v pľúcach
Indukovateľné uvoľnenie N0
Komplement C3a vazodilatácia zvýšila kapilárnu permeabilitu; aktivácia fagocytov Hypotenzia; hemoragický syndróm
Trombocyty Faktor aktivujúci doštičky Nesprávne zarovnanie zápalový proces; agregácia krvných doštičiek; prokoagulačný účinok vazodilatácia spôsobujúca hypotenziu intravaskulárna koagulácia (DIC)
Tromboxán A2
Faktor trombocytov 3
Neutrofily Katiónové proteíny Degranulácia žírnych buniek; syntéza kinínu; aktivácia komplementu Arteriálna hypotenzia; zvýšená priepustnosť kapilár
Kallikrein
Lyzozomálne enzýmy
Hagemanov faktor Aktivácia kinínového systému; aktivácia trombotvorných a fibrinolytických mechanizmov Uvoľňovanie kalikreínu a kinínov; zvýšená spotreba intravaskulárnej koagulácie fibrinogénu (DIC); krvácanie v dôsledku zvýšenej spotreby fibrinogénu; arteriálna hypotenzia
penové bunky nasýtené estermi cholesterolu vedú k tvorbe aterosklerotických plakov a opakovaný vstup do krvi exogénnych ligandov receptorov BoI a aktívne uvoľňovanie do krvi v stresových podmienkach ich endogénnych ligandov prispieva k progresii aterosklerózy. Toto hľadisko nám umožňuje kombinovať rôzne predstavy o mechanizmoch aterogenézy a úlohe takzvaných rizikových faktorov. Napriek intenzívnemu štúdiu funkcií predovšetkým receptorov rozpoznávajúcich obraz a Toll podobných receptorov nie sú mechanizmy regulácie procesov spúšťaných interakciou receptorov s ich ligandmi prakticky známe. To samozrejme komplikuje vývoj opatrení na zabránenie negatívnym následkom fungovania týchto receptorov. Naše údaje naznačujú, že pre- a probiotické lieky môžu potlačiť indukčný účinok LPS. Uznáva sa, že zvýšený cholesterol v sére je rizikovým faktorom spojeným s rozvojom aterosklerózy a ischemickej choroby srdca, ktorá je hlavnou príčinou smrti v západných krajinách. Na liečbu týchto pacientov sa používa množstvo liekov znižujúcich hladinu cholesterolu. Body pôsobenia týchto zlúčenín, napríklad statínov, sa však prekrývajú s endotoxínmi, ktoré pôsobia diametrálne opačne, čo vyvoláva obavy z možnosti ich terapeutického použitia v určitých klinických situáciách. Užívanie pre- a probiotík je prirodzenejšou metódou na zníženie sérového cholesterolu u ľudí. Užívanie týchto liekov má teda pomerne výrazný profylaktický hypocholesterolemický účinok.
Zhrnutím doteraz známych údajov o patogenéze aterosklerózy je zrejmé, že veda zhromaždila obrovské množstvo faktov o vplyve rôznych látok na výskyt a priebeh aterosklerózy. Široká koncepcia „aterosklerózy“ skrýva patologické procesy s rôznymi mechanizmami. Spája ich iba konečný morfologický substrát vo forme poškodenia cievnej steny, končiaci vývojom aterosklerotického plaku alebo špecifickým zúžením cievy.
Niektorí autori zdieľajú koncept „aterosklerózy“ s konceptom „artériosklerózy“, ktorým rozumejú zhrubnutie steny tepien v dôsledku intramurálnej fibrózy a jej kalcifikáciu, spojené s fyziologickým starnutím alebo vplyvom patogénnych látok (napríklad syfilitická artérioskleróza). Pretože artérioskleróza sa môže vyvinúť na pozadí prebiehajúcej artériosklerózy a táto samozrejme bude zhoršovať jej vývoj, niektorí autori navrhujú pre takéto prípady zaviesť pojem „artérioteroskleróza“, čo znamená spojenie týchto lézií a zapojenie cievnej steny do procesu. Iní autori, idúc do extrému iného druhu, odporúčajú považovať aterosklerózu za zvláštny prípad artériosklerózy. Napokon v zahraničnej literatúre niekedy existuje identifikácia pojmov „ateroskleróza“ a „artérioskleróza“.
Je zrejmé, že ateroskleróza je nezávislé ochorenie, ktoré sa vyskytuje vo vnútornej výstelke tepien v dôsledku penetrácie a akumulácie lipidov v nej a následného vytvárania vláknitých plakov. Nie je dôvod (patogenetický, morfologický a biochemický) zamieňať a porovnávať aterosklerózu s artériosklerózou
Určitú autonómiu mechanizmov dokazuje skutočnosť, že nie vždy výskyt hyperlipidémie vedie okamžite k rozvoju aterosklerotických zmien v cievach. Zároveň je možný rozvoj aterosklerózy za určitých podmienok bez predchádzajúcej hyperlipidémie. Je pravda, že najbežnejším faktom je stále prirodzený vzťah medzi príčinami a následkami medzi hyperlipidémiou a aterosklerotickým poškodením cievnej steny, hoci na jej vznik a implementáciu sú potrebné ďalšie faktory, jedným z nich je endotoxín gramnegatívnych baktérií - jeden z najaktívnejších a neustále pôsobiacich. faktory prispievajúce k aterogenéze. Preto je potrebné sledovať obsah endotoxínu v krvi a vyvíjať metódy prevencie a liečby hyperendotoxinémie.
LITERATÚRA
1. Ross R. Patogenéza aterosklerózy: perspektíva 90. rokov // Príroda. - 1993. - Zv. 362. - S. 801-809.
2. Klimov A.N., Nagornev V.A. Pohľad na riešenie problému aterosklerózy // Vestn. RAMS. - 1999. - č. 9. - S. 33-37.
3. Konev Yu.V., Lazebnik L.B. Metabolizmus endotoxínov v tele a jeho úloha v involučných procesoch // Klin. gerontol. - 2009. - T. 15, číslo 1. - S. 39-46.
4. Konev Yu.V., Kagan L.G., Trubnikova I.A. Dysbiotické procesy v črevách u osôb starších vekových skupín // Príručka ambulantného lekára. - 2009. - č. 3. - S. 44-48.
5. Jakovlev M.Yu. Prvky teórie endotoxínu z fyziológie a patológie človeka // Fyziológia človeka. - 2003. - T. 29, číslo 4. - S. 98-109.
6. Ryabichenko E.V., Bondarenko V.M. Úloha črevnej bakteriálnej autoflóry a jej endotoxínu v ľudskej patológii // Zh. mikro-biol. - 2007. - č. 3. - S. 103-111.
7. Cook D.N., Pisetsky D.S., Schwartz D.A. Receptory podobné mýtnemu v patogenéze ľudských chorôb // Nature Immunol. - 2004. - roč. päť,
Číslo 10. - S. 975-979.
8. Akira S, Sato S. Mýtne podobné receptory a ich signalizačné mechanizmy // Scand. J. Infect. Dis. - 2003. - roč. 35, č. 9. - S. 555-562. Preskúmanie.
9. Lykova E.A., Bondarenko V.M., Vorobiev A.A. et al. Bakteriálna endotoxinémia u detí s intestinálnou dysbakteriózou // Zhurn. mikrobiol. - 1999. - č. 3. - S. 67-70.
10. ZhangH.Y., Han de W., Su A.R. a kol. Črevná endotoxémia hrá ústrednú úlohu pri vývoji hepatopulmonálneho syndrómu na modeli cirhóznych potkanov vyvolanom mnohými patogénnymi faktormi // Svet J. Gastroenterol. - 2007. - Zv. 13, 47 - str. 6385-6395.
11. Yokude M, Kita T. Makrofág a jeho úloha v aterogenéze // Intern. Med. - 1995. - Zv. 34. - S. 281-283.
12. Erridge C., Stewart J., Poxton I.R. Monocyty heterozygotné pre mutácie Asp299Gly a Thr399Ile v géne Toll-like receptor 4 nevykazujú žiadny deficit lipopolysacharidov signalizujúcich // J. Exp. Med. - 2003. - roč. 197. - S. 1787-1791.
13. Majdalawieh A., Ro H.S. LPS indukovaná supresia odtoku cholesterolu z makrofágov je sprostredkovaná proteínom viažucim zosilňovač adipocytov 1 // Int. J. Biochem. Bunka. Biol. - 2009. - Zv. 41, číslo 7. - S. 1518-1525. EPUB 2009 8. januára.
14. Taranto M. P., Perdigon G., Medici M. a kol. Zvierací model na hodnotenie in vivo znižovania cholesterolu baktériami mliečneho kvasenia // Methods Mol. Biol. - 2004. - roč. 268. - S. 417-422.
15. Yakovlev M.Yu., Likhoded V.G., Permyakov N.K., Konev Yu.V. Endotelínom indukované poškodenie endotelu // Arkh. patol. - 1996. - T. 58, č. 2. - S. 41-46.
16. Kovalchuk L.V. Teória zápalu vo svetle nových údajov: vývoj myšlienok I. Mechnikov // Zhurn. mikrobiol. - 2008. - č. 5. - S. 10-15.
17. Liao W. Endotoxín: možné úlohy pri iniciácii a vývoji
ateroskleróza // J. Lab. Clin. Med. - 1996. - Zv. 128, č. 5. - S. 452-460.
18. Ieven M.M., Hoymans V.Y. Zapojenie Chlamydia pneumoniae do aterosklerózy: viac dôkazov pre nedostatok dôkazov // J. Clin. Microbiol. - 2005. - roč. 43, č. 1. - S. 19-24.
19. Rakoff-Wahoum S., Paglino J., Eslami-Varzaneh F. a kol. Pre intestinálnu homeostázu je potrebné rozpoznať komenzálnu mikroflóru pomocou receptorov podobných Toll. - 2004. - roč. 118, číslo 2. - S. 229-241.
20. Bondarenko V.M., Gintsburg A.L., Likhoded V.G. Úloha infekčného faktora v patogenéze aterosklerózy // Epidemiol. a infekčné choroby... - 2011. - č. 1. - S. 7-12.
21. Likhoded V.G., Bondarenko V.M. Mikrobiálny faktor a receptory podobné mýtnemu v patogenéze aterosklerózy // Zh. mikrobiol., epidemiol. a imunobiol. - 2009. - č. 6. - S. 107-112.
22. Satoh M., Shimoda Y., Akatsu T. a kol. Zvýšené hladiny cirkulácie proteínu 70 tepelného šoku súvisia so systémovou zápalovou reakciou prostredníctvom monocytového Toll signálu u pacientov so srdcovým zlyhaním po akútnom infarkte myokardu // Eur. Soc. Cardiol. - 2006. - Zv. 8. - S. 810-815.
23. Bondarenko V.M., Likhoded V.G., Jakovlev M.Yu. Stanovenie endotoxínu gramnegatívnych baktérií v ľudskej krvi // Zhurn. mikrobiol. - 2002. - č. 2. - S. 83-89.
24. Likhoded V.G., Konev Yu.V., Trubnikova I.A. et al., Detekcia endotoxínov gramnegatívnych baktérií spektrom frekvencií elektromagnetického žiarenia // Zh. mikrobiol., epidemiol. a imuno-biol. - 2007. - Č. 3. - S. 3-6.
25. Fraunberger P., Grone E., Grone H. J, Walli A.K. Simvastatín znižuje endotoxínom indukovanú aktiváciu kappaB jadrového faktora a mortalitu u morčiat napriek zníženiu cirkulujúceho lipoproteínového cholesterolu s nízkou hustotou // šok. - 2009. - Zv. 32, č. 2. - S. 159-163.
26. Bone R.C. K epidemiológii a prirodzenej histórii SIRS (syndróm systémovej zápalovej odpovede) // JAMA. - 1992. - Zv.
268, číslo 24. - S. 3452-3455.
27. Meakins J.L., Marshall J.C., Carrico Memon R.F. a kol. Syndróm zlyhania viacerých orgánov // Arch Surg. - 1986. - Zv. 121, č. 2. - S. 196-208.
28. Chizhikov N.A., Likhoded V.G., Svetukhin F.B., Jakovlev M.Yu. Endotoxín črevnej mikroflóry na klinike a patogenéza chronickej ischémie dolných končatín. - Penza, 2002. - 169 s.
29. Wiederman C. J., Kiechl S., Dunzendorfer S. a kol. Endotoxémia a ateroskleróza // J. Endotox. Res. - 2000. - Zv. 6, č. 2. - S. 86-88.
30. Yakovlev M.Yu., Anikhovskaya I.A., Meshkov M.V., Yakovleva M.M. Črevný endotoxín v regulácii aktivity systému hemostázy a patogenéza syndrómu diseminovanej intravaskulárnej koagulácie // Fyziológia človeka. - 2005. - č. 6. - S. 91-96.
31. Stewart G.J., Anderson M.J. Ultraštrukturálna štúdia poškodenia endotoxínom vyvolaného v králičích mezenterických artériách // Brit. J. Exp. Pathol. - 1971. - Zv. 52. - S. 75-80.
32. Memon R.F. a kol. Endotoxín, faktor nekrózy nádorov? A interleikín-1 znižuje aktivitu pečeňovej skvalénsyntázy, hladiny proteínov a mRNA u sýrskych škrečkov // J. Lipid Res. -1997. - zv. 38. - S. 1620-1629.
33. Ulevitch R.J. Terapeutické cielenie a vrodený imunitný systém // Nature Rev. Immunol. - 2002. - Zv. 4. - S. 512-520.
Algimed dodáva všetky potrebné reagencie, pomocné materiály a vybavenie pre test LAL všetkými liekopisnými metódami. Pre test gélovej zrazeniny a kinetickú turbidimetrickú analýzu ponúkame univerzálne činidlo LAL PYROSTAR ES-F vyrobené spoločnosťou Wako Chemicals USA, Inc. Toto činidlo je novou generáciou činidla LAL špecifického pre endotoxín. Obsahuje karboxymetyl curdlan, ktorý sa lyofilizuje spolu s lyzátom. Vďaka tomu je činidlo LAL imunné voči prítomnosti β-1,3-glukánov v prípravku.
Pre metódy inštrumentálnej analýzy, ako je napríklad chromogénna metóda, ponúkame reagencie LAL a softvér vyrobený v Lons, USA. Lonza venuje veľkú pozornosť vývoju kinetických metód analýzy vrátane novej metódy stanovenia bakteriálnych endotoxínov pomocou rekombinantného faktora C. inštalácia a implementácia IQ / OQ / PQ validácie zariadení.
Činidlo LAL
Biochemické činidlo získané z lýzovaných amébocytov (krvných buniek) krabov podkovy druhu Limulus Polyphemus. Má vysokú citlivosť na bakteriálne endotoxíny a používa sa na stanovenie ich obsahu v liekoch a aktívnych farmaceutických zložkách.
Citlivosť činidla LAL (λ)
Je označený gréckym písmenom λ. Vyjadruje sa v jednotkách endotoxínu na mililiter, EU / ml a zodpovedá minimálnej koncentrácii medzinárodného štandardu endotoxínu, ktorý pri reakcii s týmto činidlom (pri skúške gélovej zrazeniny) spôsobuje tvorbu hustého gélu, alebo zodpovedá bodu s minimálnou hodnotou na štandardnej krivke (vo fotometrických metódach analýzy). ).
Referenčný štandard pre endotoxíny (ESC)
Purifikovaný lipopolysacharid získaný z kmeňa E. Coli. Aktivita kontrolného štandardu endotoxínu sa stanoví pomocou medzinárodný štandard endotoxín. Používa sa na potvrdenie deklarovanej citlivosti činidla LAL a na nastavenie kontrol. Aktivita kontrolného štandardu je vyjadrená v endotoxínových jednotkách (EU).
Bakteriálne endotoxíny
Fragmenty bunkových stien gramnegatívnych baktérií. Sú to komplexné lipopolysacharidové komplexy. Keď sa dostane do ľudského tela parenterálnou cestou podania, spôsobí pyrogénnu reakciu (zvýšenie telesnej teploty). Pretože gramnegatívne baktérie sú všadeprítomné, môžu sa bakteriálne endotoxíny dostať do liekov pri ich výrobe z farmaceutických látok, laboratórneho skla, vody a výrobných zariadení.
Voda pre test LAL
Na prípravu roztokov činidla LAL, štandardu kontroly endotoxínov a zriedení subjektu liek na test LAL použite vodu. Voda pre test LAL musí spĺňať požiadavky na vodu na injekciu a súčasne nesmie obsahovať bakteriálne endotoxíny v množstvách určených pri teste.
Test gélovej zrazeniny
Skúšobná metóda LAL, pri ktorej sa výsledky analýzy stanovujú vizuálne. Analýza sa uskutočňuje v sklenených skúmavkách s veľkosťou 10 x 75 mm, v ktorých sa zmiešajú rovnaké časti činidla LAL a testovaného liečiva. Skúmavky s reakčnou zmesou sa inkubujú jednu hodinu vo vodnom kúpeli alebo v termobloku pri teplote 37 ° C ± 1 ° C. Po uplynutí doby inkubácie sa výsledky určia vizuálne: ak sa v skúmavkách vytvoril hustý gél, ktorý netečie dole, keď sa skúmavka obráti raz o 180 °, potom sa výsledok počíta ako pozitívny. Ak v skúmavke zostane roztok alebo sa vytvorí gél, ktorý pri obrátení skúmavky steká nadol, považuje sa výsledok reakcie za negatívny. Test na gélovú zrazeninu je najjednoduchšou metódou vykonania testu LAL, ktorá nevyžaduje nákup drahého vybavenia. Najjednoduchší spôsob, ako začať zvládnuť test LAL, je táto metóda.
Kvalitatívny test na gélovú zrazeninu (metóda A)
Účelom tejto analýzy je potvrdiť, že obsah bakteriálnych endotoxínov v testovanej vzorke nepresahuje limitnú hodnotu pre bakteriálne endotoxíny uvedenú v monografii. Pri kvalitatívnom teste na gélovú zrazeninu sa testované liečivo testuje dvakrát v jednom vybranom zriedení. Ak sa v tomto zriedení dosiahnu pozitívne výsledky, potom je obsah endotoxínov v tomto prípravku väčší alebo rovný faktoru tohto zriedenia vynásobenému citlivosťou použitého činidla LAL.
Kvantitatívny test na gélovú zrazeninu (metóda B)
Táto metóda určuje obsah bakteriálnych endotoxínov pomocou série postupných riedení testovaného liečiva. Analýza obsahuje sériu po sebe nasledujúcich dvojnásobných riedení liečiva, najmenej štyri riedenia. Pozitívna kontrola testovaného liečiva (inhibičná kontrola) je nastavená na najmenšie zriedenie testovaného liečiva, pretože inhibícia priamo závisí od koncentrácie testovaného liečiva v roztoku. Skúška určuje koncový bod reakcie pre každý replikát. Konečným bodom reakcie je najmenšie zriedenie pre každý replikát, ktorý je stále gélovitý. Koncentrácia bakteriálnych endotoxínov v testovacom prípravku pre každú replikáciu sa počíta ako produkt faktora riedenia pre koncový bod reakcie a citlivosť činidla LAL. Ďalej sa vypočíta hodnota geometrického priemeru pre všetky replikáty, ako v experimente „Potvrdenie deklarovanej citlivosti činidla LAL“.
Ak sa dosiahnu negatívne výsledky pre všetky zriedenia testovaného liečiva, potom bude obsah bakteriálnych endotoxínov menší ako hodnota faktora zriedenia najmenšieho zriedenia vynásobená citlivosťou činidla LAL.
Ak sa dosiahnu pozitívne výsledky pre všetky riedenia testovaného liečiva, potom bude obsah bakteriálnych endotoxínov väčší alebo rovný riediacemu faktoru najvyššieho riedenia vynásobenému citlivosťou činidla LAL.
Limit bakteriálnych endotoxínov
Prípustný obsah bakteriálnych endotoxínov v testovanom lieku uvedený v monografii liekopisu. Na výpočet limitu pre bakteriálne endotoxíny sa používa nasledujúci vzorec:
Limitný obsah bakteriálnych endotoxínov \u003d K / M, kde:K je prahová hodnota pyrogénnej dávky rovnajúca sa 5 EU / kg za hodinu pre testovaný liek (ak sa podáva pacientovi inou parenterálnou cestou ako intratekálnou). Pri intratekálnom spôsobe podávania liečiva je K 0,2 EU / kg;
M je maximálna terapeutická dávka testovaného lieku podaná do jednej hodiny (vyjadrená v mg, ml alebo U na 1 kg telesnej hmotnosti).
Pre rádiofarmaká podávané intravenózne sa limit pre bakteriálne endotoxíny počíta ako 175 / V, kde V je maximálna odporúčaná dávka v ml. Pre intratekálne rádiofarmaká je limit pre bakteriálne endotoxíny 14 / V.
Pre lieky, ktorých dávka sa počíta na m2 povrchu tela (napríklad protirakovinové lieky), je hraničná dávka pyrogénna (K) 100 EU / m2.Maximálne povolené zriedenie liečiva (MDR)
Maximálne povolené zriedenie (MDD) je najvyššie zriedenie testovaného lieku, ktoré sa môže použiť na stanovenie koncentrácie endotoxínu zodpovedajúcej limitnej hodnote pre bakteriálne endotoxíny stanovenej pre liek. MDR je také riedenie testovaného liečiva, pri ktorom je možné urobiť jednoznačný záver o súlade / nesúlade lieku s požiadavkami časti „Bakteriálne endotoxíny“.
Testovaný liek sa môže testovať v jednom zriedení alebo v sérii zriedení za predpokladu, že konečné zriedenie nepresahuje hodnotu MDR, ktorá sa vypočíta podľa vzorca:kde:
„Obmedzujúci obsah bakteriálnych endotoxínov“ - prípustný obsah bakteriálnych endotoxínov v testovanom lieku uvedený v monografii;„Koncentrácia testovaného roztoku“ - koncentrácia liečiva alebo účinnej látky, pre ktorú je uvedený maximálny obsah bakteriálnych endotoxínov.
λ je citlivosť činidla LAL v EU / ml.
Pozitívna kontrola testovaného lieku
Je to testované liečivo vo vybranom zriedení, ku ktorému sa pridáva endotoxín v koncentrácii, ktorá je dvojnásobkom citlivosti použitého činidla LAL (t.j. 2 λ). Táto kontrola by mala byť pozitívna a mala by sa ubezpečiť, že testovaný liek vo vybranom zriedení neinhibuje želatinačnú reakciu.
Kontrola pozitívnych skúseností
Je to voda pre test LAL, do ktorej bol pridaný endotoxín v koncentrácii, ktorá je dvakrát vyššia ako citlivosť použitého činidla LAL (t.j. 2 λ). Táto kontrola musí byť pozitívna a musí sa ubezpečiť, že štandard pre kontrolu reagencií LAL a endotoxínu nestratil svoje vlastnosti počas prepravy a skladovania.
Kontrola negatívnych skúseností
Je to voda pre test LAL. Táto kontrola by mala byť negatívna a umožňuje vám ubezpečiť sa, že všetky materiály použité v experimente neobsahujú bakteriálne endotoxíny v množstvách určených v teste.
Nič sa nenašlo: (Skúste zadať napríklad lal-reagent
Stanovenie obsahu bakteriálnych endotoxínov
Spoločnosť "Algimed" na základe vlastného vybaveného laboratória ponúka stanovenie bakteriálnych endotoxínov vo vzorkách zákazníka pomocou rôznych liekopisov metódy:
- test gélovej zrazeniny (metódy A a B)
- chromogénna kinetická metóda (metóda D)
Laboratórium tiež ponúka predbežné analýzy a vývoj analytickej metódy „Interfering Factors“ pre tie testovacie vzorky, pre ktoré už existuje zákaznícky schválený limit pre bakteriálne endotoxíny a vyžaduje sa overenie metódy pre konkrétny prípravok. Viac informácií
- Vykonanie kvalitatívnej alebo kvantitatívnej analýzy jednej vzorky, pre ktorú existuje schválená úroveň maximálneho obsahu BE - 3 360,00 rubľov vrátane DPH 20%.
- Výskumná analýza jednej vzorky, ktorá nemá schválenú úroveň maximálneho obsahu BE - 3 960,00 rubľov vrátane DPH 20%.
- Vykonanie cyklu predbežných analýz a vypracovanie metodiky stanovenia analýzy „Interferujúce faktory“ pre liek so schváleným limitom BE - 36 000,00 rubľov vrátane 20% DPH.
- Vývoj štandardného operačného postupu (SOP) pre bežné testovanie lieku na indikátor „Bakteriálne endotoxíny“, pre ktorý už existuje stanovená úroveň maximálneho obsahu BE - 14 400,00 rubľov vrátane DPH 20%.
Vzorky sa prijímajú na adrese:
Endotoxíny endotoxíny
komplexy lipopolysacharidov s bielkovinami bunkové steny gram negatívny baktérie, vlastniace vlastnosti jedy. Majú antigénne vlastnosti identické so somatickými antigénmi celej bunky (O-antigény). Na rozdiel od exotoxíny termostabilný. Izolované od všetkých patogénnych gramnegatívnych baktérií (Salmonella, Vibrio cholerae, Shigella atď.); na tomto základe v mede. mikrobiol. sa nazývajú enterotoxíny. Sú pyrogénne (spôsobujú zvýšenie telesnej teploty) a toxicitu; prvá vlastnosť je určená lipopolysacharidovou frakciou E., druhá - proteínom. Pyrogenicita a toxicita E. sú nešpecifické a predpokladá sa, že v patogenéze pôvodcu ochorenia majú iba pomocnú úlohu.
(Zdroj: „Mikrobiológia: Slovník pojmov“, Firsov N.N., M: Drop, 2006)
Endotoxínytoxické látky obsiahnuté v štruktúre baktérií (zvyčajne v bunkovej stene) a uvoľňované z nich po lýze baktérií. Častejšie sa tento názov používa vo vzťahu k lipopolysacharidom bunkovej steny gram baktérií s mm. 100 - 900 000, raž s bielkovinami a lipidmi tvorí komplexný makromolekulárny komplex. Bez ohľadu na druh majú E podobnú štruktúru a chemické zloženie, vysokú a rôznorodú aktivitu. V experimentálnych a klinových podmienkach spôsobuje E horúčku, leukocytózu s rýchlym prechodom na leukopéniu, hypoglykémiu, znižovanie krvného tlaku a šok, fenomén Sanarelli-Schwartzmann, nekrózu nádorov, zvyšujú aktivitu nešpecifických faktorov imunity, majú adjuvantnú a vysokú antigénnu aktivitu. Toxický účinok E sa prejaví okamžite po podaní, je menej výrazný ako účinok exotoxínov, nie je veľmi špecifický, je neoddeliteľne spojený s antigénnosťou: strata toxicity vedie k strate antigénnosti. Mechanizmus účinku E. je spojený s aktiváciou fosforylázy bunkovej membrány a následným uvoľňovaním kyseliny arachidónovej, ako aj so zvýšenou syntézou prostaglandínov, leukotriénov a tromboxánov. Tieto zápalové mediátory podporujú agregáciu leukocytov a krvných doštičiek a ovplyvňujú vaskulárny tonus a permeabilitu. Cm. Bakteriálne toxíny.
(Zdroj: Slovník mikrobiológie)
Zistite, čo sú „endotoxíny“ v iných slovníkoch:
Bakteriálne toxické látky, ktoré sú štruktúrnymi zložkami určitých baktérií a uvoľňujú sa iba počas lýzy (rozpadu) bakteriálnej bunky. Toto odlišuje endotoxíny od exotoxínov, rozpustných zlúčenín, ... ... Wikipedia
ENDOTOXÍNY - (z endo ... a toxínov), bakteriálne toxíny, toxické látky tvorené vo vnútri mikroorganizmov (najmä gramnegatívne baktérie). Sú pevne viazané na bunkovú štruktúru a uvoľňujú sa, keď sa bunky rozpadnú alebo zničia v ... ... Ekologický slovník
ENDOTOXÍNY - ENDOTOXÍNY, pozri Toxíny. 3HflO0TA / lbMHT (endoftalmitída), podľa Fuchsa zápal dúhovky a mihalníc, iridocyklitída alebo menej často irido choroiditída po prepichnutí očných rán (primárne E.) alebo pri prenikaní infekcie cez ... ... Skvelá lekárska encyklopédia
endotoxíny - Toxické látky, ktoré sú pevne spojené s bunkovými štruktúrami baktérií a sú uvoľňované počas bunkového rozpadu alebo deštrukcie v dôsledku fyzikálnych alebo chemických faktorov. Pozri tiež toxíny. [Anglický ruský glosár ... ... Sprievodca technickým prekladateľom
- (pozri endo ...) jedy (toxíny) \u200b\u200buvoľňované počas rozpadu mikróbov, ich smrť porov. exotoxíny). Nový slovník cudzích slov. EdwART, 2009. endotoxíny [porov. endo ... + toxíny] - bakteriálne jedy uvoľňované počas rozpadu baktérií Veľký ... ... Slovník cudzích slov ruského jazyka
Dermatovenerológia, Národné vedenie, 2011, s. 99 - 110
Črevný endotoxín a zápal
M.Yu. Jakovlev
Moderná úroveň vedeckých poznatkov umožňuje zápaltáto definícia: „Zápal je pohotovostný mechanizmusimunitná obrana zameraná na uznanie, zničeniea eliminácia cudzích a vlastných antigénov,adaptívny a / alebo patogénny charakter “. Inými slovami, respaľovanie je vždy deštruktívny proces, aj keď je to nevyhnutnéje nevyhnutné.
Interdisciplinárna definícia formulovaná vIII Kongres Ruskej spoločnosti patológov, založený na učeníI.I. Mechnikova „O úlohe črevného faktora v mechanizmoch storénium “; koncepcie G. Selyeho „Všeobecný adaptačný syndróm“ o základné príčiny nešpecifické faktory; „Klonálnašľachtiteľská teória imunity "F. Burnett a" Endotoxínpojem ľudská fyziológia a patológia “.
Tieto vedecké teórie stimulovali klinické, molekulárnenový a genetický výskum, ktorý umožnil systematizáciupredtým získané údaje o práci vrodenej a adaptívnej imunity, ich vzájomných interakciách a infekčnýchagentov. Znalosti o tomto aspekte problému až donedávnaboli fragmentárne a neumožňovali získanie jasných predbežných údajovkoncepcie mechanizmov regulácie imunitného systému črevnýmendotoxín na úrovni celého organizmu a účasť všeobecne„Nešpecifické“ faktory pri vykonávaní a iniciácii zápalulézie, pretože bez účasti systémového faktora je nemožné ajeho miestne prejavy.
Endotoxín - termostabilný zložka vonkajšej časti bunkovej membrány všetkých gramnegatívnych mikroorganizmov, lipopolysacharid (LPS), skladajúci sa z 3 častí: hydrofóbnylipid A - glykolipidRe - chemotyp identický pre endotoxsyntézy všetkých gramnegatívnych mikroorganizmov; hydrofilné jadro a polysacharid, ktoré sú individuálne a umožňujúkŕmiť gramnegatívne mikroorganizmy síroulogické metódy výskumu. Prítomnosť glykolipidu v molekule LPS rôzneho pôvodu určuje ich spoločnébiologické vlastnosti: pyrogénny a protinádorový účinokcom, schopnosť aktivovať bunkovú diferenciáciu myelocytárny rast kostnej drene a peroxidácia lipidov,stimulovať antivírusovú a antibakteriálnu imunitu,
vyvolať diseminované syndrómy intravaskulárnej koagulácie aviacnásobný orgán zlyhanie.
Celé toto jedinečné spektrum biologickej aktivity endotoxínov ažnedávno (do 1987-1988) sa uvažovalo výlučne vo formáte sepchorôb a iných infekčných chorôb, pri ktorých patogenézevedúca úloha LPS exogénnych gramnegatívnych baktérií. Účasť črevného endotoxínu na patogenéze „neinfekčnej patológie“, a ešte viac na fyziologických procesoch adaptácie, sa neberie do úvahy. Predpokladalo sa, že u zdravtelo toxínu (endotoxínu) by nemalo byť podľa definície. To isté pre mňabol tiež autorom tejto kapitoly pri použití vysoko purifikovaných protilátok protiRe -glykolipid v náteroch z periférnej krvi prakticky zdravých pacientovna povrchu nebol nájdený žiadny LPS polymorfonukleárneleukocyty.
To umožnilo postulovať nový biologický jav - systémovýendotoxinémia a naznačujú dôležitú úlohu črevného LPS pri reguláciičinnosť imunity a vznik zápalu. Najskôr boli vyvinuté nové výskumné metódy, ktoré boli radom normatívnych („fyziologických“ chemické ") ukazovatele koncentrácie sérového endotoxínu aLPS-pozitívnypolymorfonukleárne leukocyty v periférnej krvipodmienečne zdraví dobrovoľníci; potom sa zistila skutočnosť účasti nadmerného množstva LPS na patogenéze rôznych chorôb, neskôr nazývaných „endotoxín“.agresia “; a nakoniec boli identifikované vrodené imunitné receptorynite - TLR 4, interakcia s LPS a stanovenie aktivity imunhlučný systém. Takto bol overený jeden z hlavných prvkovpredtým predpokladanej systémovej endotoxinémie, molekulárnejmechanizmy imunoregulačný pôsobenie črevnej LPS, implementované akopredpokladalo sa to skôr, s priamou účasťou hypotalamo-hypofyzárneho systémunadobličkový systém. Stres (fyzický, psycho-emocionálne, inej etiológie) spôsobuje ďalší výtok cez portokaválne anastomózy portálnej krvi „bohatej“ na intestinálny endotoxín, obtekajúci pečeň, do celkového krvného obehu. V stave relatívneho odpočinku, t.j. pri absencii stresuvplyvov, viac ako 95% portálnej krvi vstupuje do pečene, kde sú všetky LPSeliminované fixným makrofágovým systémom. Pečeň je najviac „nevyhnutnádaný „orgán v endotoxínoch, pretože pri ich interakcii sTLR 4 palce makrofágy, syntéza najdôležitejších prozápalový cytokíny novýposkytujúci základný fyziologický tón protinádorového, antibakteriálna a antivírusová imunita 1. Nie je spotrebovaný pečeňou LPS s návratom žlče do čriev, ale s najväčšou pravdepodobnosťou už bez polysacharidučasti.Časť endotoxínu (menej ako 5%) vstupuje do celkového množstva hemocirkulácia a udržuje všetko v stave fyziologického tónu imunokompetentný orgánov (kostná dreň, týmus atď.) a buniek ( prezentujúci antigén, polymorfonukleárne leukocyty, lymfocyty atď.). Preto systémový endotoxinémia hrá mimoriadne dôležitú úlohu pri udržiavaní fyziologického tonusu imunitného systému. V mimoriadnych situáciách(strach, strach, orgazmus, cvičiť stres), vždy sprevádzané stresom,imunostimulačný účinok endotoxinémie sa zvyšuje so zvyšovaním koncentrácie črevného LPS vo všeobecnom obehu. Je zrejmé, že teda fyzioterapialogické koncentrácie endotoxínov kolíšu vo veľmi širokom rozmedzí (od takmer nuly do 1,0EU / ml ) a majú stálu tendenciu sa zvyšovaťs vekom. Vo veľmi zriedkavých prípadoch nemožno zistiť LPS v sére (alebo skôrjeho koncentrácia je menšia ako 0,0001EU / ml ). Títo pacienti sú charakterizovanídošlo k výraznému zníženiu hlavných ukazovateľov imunitného stavu. Existuje však aj fenomén tolerancie na endotoxín - nedostatok charakterutŕnistá pyrogénna reakcia na dostatočne vysokej úrovni (významne presahujúcahorná hranica normy) koncentrácie endotoxínov v krvi. Na implementáciubiologické vlastnosti endotoxínu (najmä na interakciu LPS sTLR 4) lipoproteín s vysokou hustotou (HDL) viažuci LPS proteín (proteín akútnej fázy syntetizovaný v pečeni), ktorý prenáša endotoxínycD receptor 14 a niektoré ďalšie proteínové molekuly a kofaktory. Deficitjeden alebo viac z vyššie uvedených faktorov, z ktorých väčšinasyntetizované v pečeni, môže spôsobiť imunodeficientný stavy, ktoré sa najčastejšie vyskytujú pri užívaní protizápalových liekov u pacientov s hepatálnou insuficienciou a u pacientov s koncentrácious LPS vo všeobecnom prietoku krvi pod 0,0001EU / ml.
1 Hpravdepodobne preto sú zvieratá gnotobiontov prakticky bezbranné proti infekciimi a sú oveľa pravdepodobnejšie onkologické choroby... „Mikrobiálne“ zvieratáchýbajú imunostimulačný účinok intestinálneho LPS, pretože nemajú gramnegatívne účinkymikroflóra. (Bude akceptovať, vyd.)
Pre komplexnejšie pochopenie predloženého materiálu sme to považovali za účelnénázorne zhrnúť základné princípy imunitného systémusystémy a interakcie vrodenej a adaptívnej imunity.
Vrodená imunita z dôvodu činnosti niekoľkých stoviekrespiračné gény, ktoré zabezpečujú syntézu vhodného počtu receptorov.Sú to oni, ktorí sa podieľajú na boji proti infekcii počas prvých 3 - 5 dní (pred formáciou)klony lymfocytov a akumulácia skupiny špecifických protilátok) v dôsledku aktivácie komplementu, pôsobenia antimikrobiálnych peptidov a aktivity fagocytov. Okrem toho vrodená imunita „organizuje“ najmä prácu adaptačnýchsti, v dôsledku interakcie LPS sTLR 4 2 a školstvo hlavné prozápalový cytokíny, ktoré zabezpečujú implementáciu špecifickej imunitnej odpovede.Teda evolučne starodávnejší systém vrodenej imunityspravuje viac „mladých“ adaptívnych.
Adaptívna imunita je do veľkej miery zabezpečený náhodným procesomsomatické mutácie lymfocytov, v dôsledku ktorých sa objavujú receptory,schopné rozpoznať akýkoľvek (aj syntetický) antigén vrátane autoantigénov, protilátok (AT ), ktoré sú neustále prítomné vo všeobecnom krvnom obehu.Počet takýchto receptorov za fyziologických podmienok dosahuje astronómiuhodnoty. Tento princíp organizácie adaptívnej imunity umožňuje poskytnúť spoľahlivý systém obrany tela pred infekciamiškodlivé mutácie na jednej strane a na druhej strane predstavuje veľké nebezpečenstvoautoimunitné poškodenie. Skutočnosť, žeže na regulácii tohto procesu sa podieľa vrodená imunita, ktorej aktivita je vo veľkej miere určená koncentráciou LPS vo všeobecnostiprietok krvi.
Vrodená a adaptívna imunita funguje v tandeme, čo je možné ilustrovať na príklade fagocytov, ktoré sa tiež aktivujú črevnýmiendotoxín. Najväčšia populácia imunokompetentný bunkyje na vrchole interakcie vrodenej a adaptívnej imunity kvôliprítomnosť na jeho povrchuFc-receptory, ktoré sú schopné prijať
všetko AT , čo znamená špecificky interagovať s rôznymi antigény, ktoré umožňujú charakterizovať neutrofil ako fagocyt multišpecifické akcie, ktorá sa predtým skrývala pod pojmom „ nešpecifickosť».
Za fyziologických podmienok ich nesie 5-7% cirkulujúcich leukocytovpovrchu LPS a približne rovnaký počet fagocytovviažeme endotoxínyv in vitro. Pri interakcii s LPS je fagocytárnyzvyšuje sa potenciál neutrofilov a ich adhezívna aktivita. Odchádzajúvaskulárne riečisko a potom telo (ako súčasť vylučovania: výkaly, moč, pot atď.), plní ochrannú funkciu „pohraničnej stráže-kamikadze“ v stróme orgánov atkanivá v priamom kontakte s vonkajším prostredím.
Preto systémový endotoxinémia (SEE) - regulačný mechanizmus činnosť imunity črevným LPS s priamym postihnutím systém hypotalamus-hypofýza-nadobličky. Stresové bytieatribút samotného života, na jednej strane poskytuje injekciu do celkového krvného obehudodatočná časť univerzálneho imunostimulant, a na druhej strane - kukuričné \u200b\u200bpolelyrický mocný prozápalový účinok jeho prebytku zvýšenou syntézouglukokortikoidy (Obrázok 8-1). Týmto sa dosiahne veľmi nestabilný stav„vyvážený imunitný stav“, ktorý je v podmienkach dostatočnejpresne dlhé obdobie adaptácie (predĺžený stres) môže byťzlomený. Zvýšenie koncentrácie črevného LPS vo všeobecnom obehu môže prekročiť fyziologicky prijateľné hodnoty (sú čisto individuálne a majú vekové charakteristiky) a slúžia ako jediný dôvod na začatielokálna zápalová reakcia (alebo jej exacerbácia) a systémovázápalová reakcia, s väčšou alebo menšou závažnosťou, ktorá vždy sprevádza zápal (zvýšená telesná teplota, koncentrácia bielkovínakútna fáza, ESR; leukocytóza atď.). ana regulácii sa priamo podieľa prispôsobenie tela neustále sa meniacim podmienkam vonkajšieho a vnútorného prostrediaaktivita imunity a zahájenie zápalu, nepriamo - vo zvýšeníkoncentrácia črevného endotoxínu vo všeobecnom obehu. Takže stresmôže byť jediným dôvodom rozvoja endotoxínovej agresie a naprdôsledkom je zápal.
Obrázok: 8-1. Systémová endotoxinémia - vyvážený imunitný stav.
Obrázok: 8-2. Agresia endotoxínov ako príčina zápalu.
Endotoxín agresia- patologický proces v dôsledku prebytkucom LPS črevného a / alebo iného pôvodu vo všeobecnom krvnom obehu, ktorý májeho klinické a laboratórne prejavy je „predchorobie“ alebo univšeobecný spoločný faktor v patogenéze chorôb a syndrómov, ktorý sa prejavuje jednou alebo druhou nozologickou formou ochorenia v dôsledkuinštitucionálna a / alebo získaná predispozícia 3. Tento univerzálnyúčinok agresie endotoxínu sa dosahuje najmenej tromi spôsobmi:indukcia autoimunitných reakcií (v dôsledku charakteristík adaptívnej imunity), tvorba hyperergický imunitné pozadie a autoagresialeukocyty. Dôvody rozvoja agresie endotoxínov sú veľmi rozmanité: najbežnejším je stres, ako aj akékoľvek patologické procesy vedúce k zvýšeniu priepustnosti črevnej bariéry (otrava jedlom a akútnečrevné infekcie, prebytok alkoholu a dysbióza, nezvyčajne tučné a korenené jedlo, akútne vírusové infekcie, šok atď.), portálna hypertenzia a ochorenie pečene, chronické a akútne zlyhanie obličiek (pretože práve obličky slúžia ako hlavný orgán vylučujúci LPS). Najjasnejšiemechanizmus prozápalový akcie vo veľmi zjednodušenej podobe (obr. 8-2)možno reprezentovať príkladom dlhotrvajúceho stresu ( psycho-emocionálne preťaženie, depresia, hyper - a hypotermia, extrémna fyzická aktivita atď.).
3 Zavedeniu tohto pojmu predchádzalo mnohoročné bádanie mnohých domácicha zahraničných vedcov vrátane vytvorenia metód dostupných v klinickej praxi na stanovenie integrálnych ukazovateľov koncentrácie a aktivity LPS antiendotoxínimunita, definícia štandardných ukazovateľov. Preto sa v tejto kapitole obmedzíme iba na tie najdôležitejšie. (Bude akceptovať, vyd.)
Stres-indukovanýprozápalový vplyv endotoxínov na definíciustupeň leno je zastavený opačným pôsobením glukokortikoidy... Presyntéza týchto hormónov využíva cholesterol, ktorý vstupuje do kôrynadobličky výlučne v kombinácii s lipoproteínmi s vysokou hustotou (HDL), ktorých afinita k LPS je oveľa vyššia ako k cholesterolu. To je dôvod, prečo nadbytok endotoxínov vedie k nedostatku HDL, ktorý čiastočne blokuje syntézu glukokortikoidy a vedie k zvýšeniu prozápalovýúčinok. Ako výsledok, hypercholesterolémia a zvyšuje sa “ aterogénny index “, ktorý sa dlhé roky mylne považoval za prejav porušeniametabolizmus lipidov a základ pre vznik aterosklerózy. V súčasnosti ich má máloktoktorí majú pochybnosti o zápalovej povahe aterosklerózy, najmä o úlohe „endotelovej dysfunkcie“ pri jej iniciácii (endotelová dysfunkcia je zase vyvolaná endotoxínovou agresiou, ktorá sa predpovedala v roku 1987). Tento koncept je veľmi presvedčivo potvrdený poklesom koncentrácie „aterogénnych“ lipoproteínových frakcií (nízky a veľmi vysokýnízka hustota) s poklesom obsahu LPS (<1,0 EU / ml) v sére.